Временные методические указания по определению остаточных количеств фюзилада в свекле методом газожидкостной хроматографии
(утв. Минздравом СССР 23.05.1985 № 3875-85)
23 мая 1985 г. № 3875
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ФЮЗИЛАДА В СВЕКЛЕ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Госагропрома СССР.
Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.
1. Краткая характеристика препарата
Форма препарата: 25% эмульгирующий концентрат.
Действующее вещество — бутил-2-(4-(5-трифторметилпиридин-2-окси)фенокси)пропионат.
CH
F C-\ ___ /-O-\ ___ /-OCHCOO(CH ) C H F NO 3 ─── ─── 2 3 19 20 3 4 N N
Жидкость светло-желтого цвета; температура кипения - 170 °С при 0,5 мм рт. ст.; плотность - 1,21 г/куб. см, устойчив 6 месяцев при температуре 37 °С; растворимость: в воде - 2 мг/л, в пропиленгликоле - 20 мл/л, полностью смешивается с ацетоном, циклогексаном, гексаном, метанолом, ксилолом,
CH Cl .
2 2 Препарат малотоксичен для млекопитающих, ЛД для крыс при пероральном
50
введении — 3328 мг/кг.
Фюзилад применяется для борьбы с однолетними и многолетними злаковыми сорняками как послевсходовый гербицид на посевах сахарной свеклы, подсолнечника и др. овощных культур.
2. Методика определения фюзилада в свекле методом газожидкостной хроматографии
2.1. Основные положения
2.1.1 Принцип метода
Метод основан на извлечении фюзилада из растительного материала (свеклы) гексаном, очистке от примесей на силуфоле при развитии хроматограммы (дважды) бензолом, извлечении с поверхности силуфола этанолом, переводе в гексан и хроматографическом определении.
2.1.2 Метрологическая характеристика метода
Наименование действующего вещества — бутил-2(2-(5-трифторметилпиридин-2-окси)фенокси)пропионат.
Число параллельных определений — 5.
Размах варьирования — 77 — 83%.
Среднее значение определения — 78,4%.
Стандартное отклонение — 3,13%.
Относительное стандартное отклонение — 3,99%.
Доверительный интервал — 3,86.
Предел обнаружения — 0,01 мг/кг.
2.1.3 Избирательность метода
Другие гербициды, применяемые для выращивания свеклы, определению не мешают (бетанол, бетанекс, голтикс, лонтрел).
2.2. Реактивы и растворы
н-Гексан, ч., ТУ 6-09-3375-78.
Натрий сернокислый безводный, ч.д.а., ГОСТ 4166-76.
Бензол, х.ч., ГОСТ 5955-81.
Спирт этиловый, 96-процентный, ТУ 6-09-1710-77.
Фаза — Хроматон-N-супер 3% ХЕ-60 (0,16 — 0,20 мм).
Стандартный раствор готовится растворением 100 мкг химически чистого бутил-2(4-(5-трифторметилпиридин-2-окси)фенокси)пропионата в 100 мл гексана (1 мг/мл). При необходимости приготовляется промежуточный раствор, содержащий 0,1 мг/мл.
2.3. Приборы и посуда
Прибор для отгонки растворителей ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.
Колбы конические емк. 100 мл, ГОСТ 10394-72.
Воронки химические, ГОСТ 8613-75.
Колбы грушевидные, ГОСТ 10394-72.
Капилляры, микропипетки, ГОСТ 20292-74.
Фильтры бумажные, ТУ 6-09-1678-77.
Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74.
Шприц емк. 10 мкл, ТУ 2-833-106.
Хроматограф «Цвет-106» с детектором по захвату электронов (ДЗЭ).
Азот газообразный, особой чистоты, содержание O не более 0,003%, ГОСТ 2 9293-74.
2.4. Отбор, хранение и доставка проб
2.4.1. Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными Заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.79 за № 2051-79.
Пробу свеклы 100 — 200 г очищают, доводят до пищевого вида, измельчают ножом или на мясорубке и отбирают среднюю пробу 25 — 50 г.
2.5. Проведение определения
2.5.1 Экстракция препарата из анализируемой пробы
Измельченную навеску 25 — 50 г помещают в коническую колбу, заливают гексаном на ночь. Количество свеклы зависит от предполагаемого содержания фюзилада в пробе. При малых содержаниях навеска составляет 50 г, при больших содержаниях целесообразно уменьшить до 25 г свеклы. Проба заливается гексаном в количестве 25 — 30 мл в зависимости от навески пробы и оставляется на ночь; при взбалтывании продолжительность экстракции сокращается до двух часов.
Гексановый экстракт отделяют от массы фильтрованием через бумажный фильтр со слоем натрия сернокислого безводного 5 г и упаривают до 0,5 мл на ротационном испарителе при температуре 68 °С.
2.5.2 Проведение определения
Упаренный экстракт 0,5 мл количественно стеклянным капилляром или микропипеткой переносится на пластинку «Силуфол».
Ширина пластины 20 мм, высота 150 мм. Нанесение производится в 5 точек по горизонтали на высоте 15 мм от края пластины. Расстояние между точками по 3 мм.
Затем, для очистки от сопутствующих веществ, содержащихся в свекле и мешающих определению, производят хроматографирование полученной пробы. Хроматограмму дважды развивают в бензоле с подсушиванием при температуре 70 — 90 °С.
Опыт показывает, что фюзилад движется с R от 0,18 до 0,21, а f
сопутствующие вещества, содержащиеся в свекле, делятся на три части: одна
из них движется с R = 0, - 0,11, другая движется с R от 0,32 до 0,55,
f f
третья часть веществ движется вместе с фюзиладом. Для очистки пробы от этих веществ применяется второй этап очистки. Тонкий слой силуфола на расстоянии
от 12 мм до 30 мм от точек нанесения пробы с зоной локализации фюзилада счищается в пробирку, заливается этанолом (примерно 1 мл). Экстракция длится 40 - 60 мин. при периодическом встряхивании или помешивании. Содержимое пробирки фильтруют через бумажный фильтр, пробирку обмывают этанолом. Общее количество этанола (на все операции) не превышает 5 мл. Затем этаноловый экстракт упаривают досуха в пробирке током воздуха. Оставшийся в пробирке фюзилад растворяют количественно (0,5 мл) в гексане
5 — 10 мин., периодически встряхивая, и аликвота вводится в хроматограф.
2.5.3 Газожидкостная хроматография
Для анализа используется н-гексановый экстракт пробы 0,5 мл, полученный как описано в п. 2.5.2. В испаритель хроматографа вводят 10 мкл экстракта и
анализируют в условиях: колонка стеклянная 2 х 3 мм; носитель Хроматон N-супер (0,16 - 0,20 мм); неподвижная фаза - 3% ХЕ-60; скорость азота 21 мл/мин.; температура колонки - 175 °С; температура испарителя - 200 °С;
-12
температура детектора — 180 °С; рабочая шкала электрометра — 200 х 10 а;
время удерживания 11'45» при указанных условиях хроматографирования.
2.6. Обработка результатов
Количественное определение проводят методом соотношения со стандартом по высоте пиков, расчет ведут по формуле:
А х Н х V х V
2 1
Н х V х Р
1 2
где:
Х — содержание гербицида в пробе, мг/кг;
А — количество гербицида в стандартном растворе, введенном в хроматограф, мкг/мл;
V — объем стандартного раствора гербицида, введенного в хроматограф, 1 мкл;
Н — высота пика стандартного раствора гербицида, мм; 1
Н — высота пика гербицида в пробе, мм; 2
V — объем пробы, введенной в хроматограф, мкл; 2
V — общий объем экстракта после упаривания и разведения, мл;
3. Требования безопасности
Соблюдаются требования безопасности, рекомендуемые для работы с органическими растворителями и токсическими веществами.
4. Методические указания разработаны к.т.н. Криволуцким К.В., к.б.н. Примаком А.П., Тулуповой С.В., Всесоюзный научно-исследовательский институт селекции и семеноводства овощных культур, г. Москва.