Методические указания по определению монурона и диурона в чае методом газожидкостной хроматографии
(утв. Минздравом СССР 03.01.1985 № 3187-85)
3 января 1985 г. № 3187-85
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МОНУРОНА И ДИУРОНА В ЧАЕ
МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Госагропрома СССР.
Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.
1. Краткая характеристика препаратов
Физико-химические свойства фенилмочевинных гербицидов приведены в Методических указаниях по определению фенилмочевинных гербицидов в воде методом газожидкостной хроматографии.
2. Методика определения фенилмочевинных гербицидов
2.1. Основные положения
2.1.1 Принцип метода
Метод заключается в извлечении препаратов из исследуемых проб ацетоном, перераспределении в системе вода — хлороформ, кислотном гидролизе в ароматические амины, извлечении последних из водного раствора бензолом, получении производных для ГЖХ и определении методом ГЖХ. Производные получают, обрабатывая аликвоту бензольного экстракта ангидридом 3-трифторметокси-2,2,3,3-тетрафторпропионовой или гептафтормасляной кислот.
CH +
─── / 3 H ───
1. // \\-NHCON ────────> // \\-NH
\/___ / \ H O \/___ / 2
/ ─── CH 2 / ───
R 3 R
n n
F
(R CO) O
─── 2 ─── F
2. // \\-NH ────────> // \\-NHCOR
<pre class="legal-pre"> \/___ / 2 \/___ /
/ ─── / ───</pre>
R R
n n
F
R = C F , CF CF OCF 3 7 2 2 3
2.1.2 Метрологическая характеристика метода при n = 5, р = 0,95 (при
-3
внесении 0,75 х 10 мг гербицидов) на 10 г сухого чая.
Среднее значение определения с, %:
Стандартное отклонение S , %: n
Относительное стандартное отклонение S , %: z
S х t
n альфа
Доверительный интервал (С +/- -----------), %: _ /n
2.1.3 Избирательность метода
Определению могут мешать соединения, дающие при гидролизе ароматические амины.
2.2. Реактивы и растворы
Ацетон, о.с.ч., ТУ 6-09-3513-75.
Хлороформ фарм., ГОСТ 20015-74, перегнанный.
Бензол, х.ч., ГОСТ 5955-81. Встряхивают 1 л бензола со 100 мл концентрированной серной кислоты, бензол промывают раствором соды и дистиллированной воды, сушат безводным сульфатом натрия и перегоняют.
н-Гексан, ч., ТУ 6-09-3375-78.
Спирт этиловый 96-процентный, ТУ 6-09-1710-77.
Серная кислота концентрированная d = 1,82, ч., ГОСТ 4204-77.
Натрий гидроокись, х.ч., ГОСТ 4328-77, 15% раствор.
Натрий углекислый кислый, ч.д.а., ГОСТ 4201-79, 0,1% раствор.
Натрий сернокислый безводный, ч., ГОСТ 4166-76.
Ангидрид 3-трифторметокси-2,2,3,3-тетрафторпропионовой или гептафтормасляной кислот. Для получения ангидрида полифторкарбоновые кислоты кипятят над равным объемом фосфорного ангидрида 3 часа, затем отгоняют ангидрид 3-трифторметокси-2,2,3,3-тетрафторпропионовой кислоты при 112 — 114°, ангидрид гептафтормасляной кислоты — при 108°.
Азот, о.с.ч., ГОСТ 9293-74, или аргон, ч., высший сорт, содержание O — 2 0,002%.
Хроматон N-AW-ДМСS (0,16 — 0,20 мм) с 5% ХЕ-60 (ЧССР).
Стандартные растворы фенилмочевин в водно-этанольном растворе с концентрацией 0,50; 0,75; 1,00 мкг/мл готовят последовательным разбавлением водой стандартных растворов 0,1 мг/мл.
2.3. Приборы и посуда
Хроматограф «Цвет-106» (или любой другой с детектором по захвату электронов).
Колонка стеклянная 1 м х 3 мм.
Аппарат для встряхивания любого типа АВУ-1, ТУ 64-1-1081-73.
Ротационный испаритель вакуумный любого типа ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.
Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.
Баня металлическая или масляная
Термометры электроконтактные до 100° и 150°, ГОСТ 9871-75.
Воронки делительные емкостью 100 мл, тип УШ, ГОСТ 8613-75.
Колбы круглодонные емкостью 100 мл, тип КККШ, ГОСТ 10394-72.
Колбы плоскодонные конические емкостью 100 и 25 мл, тип КН, ГОСТ 10394-72.
Холодильники с водяным охлаждением, тип ХПТ-КШ, ГОСТ 9499-70.
Воронки фильтрующие (Шотта) диаметром 20 мм, тип ВФ, ГОСТ 9775-69.
Пробирки градуированные со шлифом емкостью 10 мл, тип ПГКШ, ГОСТ 10515-75.
Колбы мерные емкостью 50 мл, тип 1а, ГОСТ 1660-74.
Пипетки емкостью 1, 5, 10 мл, ГОСТ 20292-74.
Микрошприцы на 10 мкл МШ-10М, ТУ 2-833-106.
2.4. Проведение определения
2.4.1 Отбор пробы
Отбор проб осуществляется в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными Зам. Главного государственного санитарного врача СССР за № 2051-79 от 21.08.1979. Шифр 3.4.4.3.9.1.
2.4.2 Экстракция
Навеску чая (10 г) помещают в плоскодонную колбу емкостью 100 мл, приливают 40 мл ацетона, встряхивают на аппарате для встряхивания в течение 30 мин., отфильтровывают через бумажный фильтр. Колбу и фильтр дважды промывают 10 мл ацетона. Объединенный экстракт отгоняют на ротационном испарителе при 50° до нескольких капель. Остаток растворителя
удаляют в токе воздуха, добавляют 3 мл концентрированной H SO , выдерживают
2 4 30 мин., приливают 20 мл 15% NaOH и экстрагируют хлороформом порциями 10 мл и два раза по 5 мл. Экстракты объединяют и отгоняют на ротационном
испарителе при температуре бани 50° до нескольких капель, которые удаляют в токе воздуха.
2.4.3 Гидролиз и количественное определение
Приливают в колбы 4,5 мл воды и 0,5 мл концентрированной серной кислоты, выдерживают с обратным холодильником при температуре бани 120° 1,5 часа, охлаждают, смывают стенки и шлиф холодильника 5 мл воды, переносят в делительную воронку и промывают 5 мл бензола при энергичном встряхивании. Водный слой сливают в колбу, приливают 5 мл бензола и нейтрализуют при охлаждении 15% раствором гидроокиси натрия до рН 10, контролируя по универсальной индикаторной бумаге. Закрывают колбу притертой пробкой и энергично встряхивают в течение минуты, затем переливают содержимое колбы в делительную воронку. Отделяют бензольный слой и фильтруют его через 0,5 см слой безводного сульфата натрия, засыпанного в воронку Шотта. К фильтрату добавляют микрошприцем 5 мкл реагента — ангидрида полифторкарбоновой кислоты, через 5 мин. добавляют 10 мл 0,1% раствора натрия углекислого кислого и встряхивают. Отделяют бензольный слой, добавляют 1 г безводного сульфата натрия, отбирают и вводят 5 мкл раствора в хроматограф.
2.5. Условия хроматографирования
Газ-носитель — аргон ч. При разработке методики в качестве газа-носителя использовали аргон ч., при использовании азота о.с.ч. чувствительность детектирования увеличивается в 4 — 5 раз.
Скорость газа-носителя через колонку — 45 мл/мин.
Скорость газа-носителя на продувку детектора — 150 мл/мин.
Температура испарителя — 250°, детектора — 250°, температура колонки — 160°. -12
Рабочая шкала электрометра 20 х 10 А при использовании в качестве -12 газа-носителя аргона и 100 х 10 — при использовании азота о.с.ч.
Скорость диаграммной ленты потенциометра — 240 мм/ч.
Времена удерживания гексахлорбензол монурон диурон (производные гептафтормасляной кислоты)
абсолютные (с) 76 80 212 относительные 1 1,05 2,79
Линейность сигнала детектора сохраняется до содержания анилидов во вводимой пробе, равного 1 нг, при больших концентрациях раствор необходимо разбавлять.
2.6. Обработка результатов анализа
Количественное определение проводят по калибровочному графику. Для построения калибровочного графика в серию колб вносят по 1 мл стандартного раствора фенилмочевины, содержащего 0,50; 0,75; 1,00 мкг гербицида, приливают 3,5 мл воды и 0,5 мл серной кислоты и проводят гидролиз, ацилирование, ГЖК-анализ так, как описано выше. Строят график зависимости:
С — содержание гербицида в стандартном растворе, мкг.
Содержание гербицида в анализируемой пробе вычисляют по уравнению:
А
Х — содержание препарата в анализируемой пробе, мг/кг;
Р — количество анализируемой пробы, г.
3. Требования безопасности
Соблюдаются обычные требования по технике безопасности, необходимые при работе с органическими растворителями, кислотами и щелочами. Работа с ангидридами полифторкарбоновых кислот производится в вытяжном шкафу.
4. Методические указания подготовлены: Г.С. Куликовой, к.х.н. В.Е. Кириченко, д.х.н. К.И. Пашкевичем.