Методические указания по определению остаточных количеств омайта в меде методом тонкослойной хроматографии

(утв. Минздравом СССР 30.09.1984 № 3068-84)

30 сентября 1984 г. № 3068-84

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ОМАЙТА В МЕДЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

---

<*> Разработаны Л.Н. Татишвили, Н.З. Патиашвили (НИИ гигиены труда и профзаболеваний, г. Тбилиси).

    Краткая  характеристика   препарата.   Омайт - 2-(4-трет-бутил-фенокси)
циклогексил  (пропин-2-ил)-сульфит.  Брутто формула C  H  O S. Молекулярная

                                                 19 26 4

масса  350,5.  Общепринятое название - пропаргит. Химически чистый препарат
представляет  собой  темно-коричневую жидкость. Давление пара 400 Па при 20
°C.  Практически  нерастворим  в воде, смешивается со многими органическими

растворителями. ДСД 0,15 мг/кг.

Принцип метода. Метод основан на определении омайта методом ТСХ после предварительного извлечения его из анализируемого объекта хлороформом и очистки полученного экстракта хроматографией на колонке с оксидом алюминия.

Метрологическая характеристика метода. Диапазон определяемых концентраций 0,3 — 3 мг/кг. Предел обнаружения 10 мкг в пробе. Среднее значение определения 77,5%. Доверительный интервал при p = 0,95 и n = 5 77,5 +/- 11,5%.

Реактивы и растворы. Ацетон ч.д.а. Нитрат серебра х.ч. Лимонная кислота х.ч. Оксид алюминия для хроматографии. Хлороформ х.ч. н-Гексан. Подвижная фаза: н-Гексан-ацетон (54:1). Проявляющий реагент: 0,03 г бромфенолового синего растворяют в 10 мл ацетона и доводят до 100 мл 0,5-процентным водно-ацетоновым раствором нитрата серебра (1 часть воды и 3 части ацетона); 5-процентный раствор лимонной кислоты в смеси вода-ацетон (1:3). Стандартные растворы: № 1 — омайт в ацетоне с содержанием препарата 500 мкг/мл; № 2 — омайт в ацетоне с содержанием препарата 100 мкг/мл. Стандартные растворы устойчивы в течение 2 мес. в холодильнике.

Приборы и посуда. Хроматографические пластинки «Силуфол» УФ размером 254

15  x  15 см. Воронки делительные на 100 мл. Колбы мерные на 100 мл. Камера
хроматографическая.  Пульверизаторы стеклянные. Шприцы медицинские на 1 мл.
Баня  водяная.  Чашки  фарфоровые  диаметром  4  - 5 см. Колонки стеклянные
размером  20  x  1  см.  Микропипетка вместимостью 0,1 - 0,2 мл с оттянутым

концом.

Подготовка к определению хроматографической колонки. Оксид алюминия для хроматографии помещают в колонку слоем 10 см и промывают 15 мл хлороформа.

Ход анализа. Экстракция препарата из анализируемой пробы. К 30 г меда прибавляют 2 мл горячей дистиллированной воды и нагревают на водяной бане при 50 °C до полного разжижения. Пробу помещают в делительную воронку, препарат экстрагируют дважды по 30 мл хлороформа в течение 10 мин. Объединенный хлороформный экстракт упаривают на ротационном испарителе до 2 мл при температуре бани не выше 60 °C.

Хроматографическая очистка на колонке. Остаток количественно переносят на хроматографическую колонку и элюируют омайт 40 мл хлороформа. Элюат упаривают до 2 — 3 мл, после чего удаляют остаток досуха в токе воздуха. Полученный сухой остаток растворяют в 0,1 мл хлороформа.

    Хроматография  и  тонком  слое. В стартовое пятно на хроматографической
пластинке  количественно  наносят  всю  пробу.  Колбу несколько раз омывают
хлороформом  (по  0,1  мл),  который наносят в то же стартовое пятно. Рядом
наносят  серию стандартных растворов омайта. Хроматографирование проводят в
системе  гексан-ацетон  (4:1). После подъема растворителя на высоту 12 - 13
*см*  пластинку  вынимают,  высушивают  на  воздухе и опрыскивают проявляющим
реагентом.  Омайт  проявляется  в  виде  пятен синего цвета на желтом фоне.
Величина R  омайта в системе гексан-ацетон (4:1) составляет 0,45 +/- 0,05.

      F

Обработка результатов. Количественно омайт определяют путем сравнения площади и интенсивности пятен стандартного раствора с пятнами в пробе. Содержание омайта (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:

                                  A

X = -, P

где:

X — содержание омайта, мг/кг;

A — количество омайта, найденное путем сравнения со стандартом, мкг;

---