Методические указания по определению цианокса в меде методом тонкослойной хроматографии
(утв. Минздравом СССР 31.07.1984 № 3067-84)
Примечание
Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 № 299).
31 июля 1984 г. № 3067-84
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ЦИАНОКСА В МЕДЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
<*> Разработаны В.И. Ярошенко (ЦНИИЭВ).
Краткая характеристика препарата. Цианокс - О,О-диметил-О- (4-цианофенил) тиофосфат. Брутто-формула C H NO SP. Молекулярная масса 9 10 3
370,5. Общепринятое название — цианофос. Действующее вещество представляет
собой жидкость светло-желтого цвета, т. пл. 14 - 15 °C. Цианокс практически нерастворим в воде, хорошо растворим в спиртах, кетонах, ароматических углеводородах. Применяется в качестве инсектоакарицида на
плодовых, цитрусовых и технических культурах. ДСД 0,003 мг/кг.
Принцип метода. Метод основан на извлечении цианокса из водного раствора меда гексаном, разрушении эмульсии спиртом и определении хроматографией в тонком слое оксида алюминия.
Метрологическая характеристика метода. Предел обнаружения 0,5 мкг. Предел определения 0,05 мг/кг. Среднее значение определения стандартных количеств цианокса 85%. Стандартное отклонение +/- 8,12%; доверительный интервал среднего (при p = 0,05 и n = 9) +/- 8,29%.
Избирательность метода. Метод избирателен в присутствии ХОП, так как под воздействием УФ-лучей пятна цианокса исчезают, а пятна ХОП остаются.
Реактивы и растворы. Алюминия оксид II степени активности. Аммиак водный ч.д.а, 25-процентный. Гексан х.ч. Кальция сульфат ч.д.а., прокаленный при 160 °C в течение 6 ч. Натрия сульфат безводный ч.д.а. Пергидроль х.ч., 30-процентный водный раствор. Серебра нитрат ч.д.а. Спирт этиловый ректиф. Цианокс х.ч. или технический препарат.
Приборы и посуда. Аппарат для встряхивания. Весы торсионные. Камеры хроматографические. Камеры для опрыскивания хроматограмм. Пластинки стеклянные для хроматографии размером 9 х 12 см. Посуда химическая (колбы на 100 мл, воронки делительные, пипетки, стаканы химические, цилиндры мерные). Опрыскиватели стеклянные. Термостат или сушильный шкаф. Чашки для выпаривания. Флакончики с притертыми пробками. Микропипетки на 0,1 и 0,2 мл.
Подготовка к определению. Для приготовления стандартного раствора цианокса препарат (10 мг) растворяют в 100 мл ацетона (содержание пестицида составляет 100 мкг в 1 мл). Хранят на холоде в плотно закрытой посуде.
Для приготовления проявляющего реагента нитрат серебра (0,1 г) растворяют в 1 мл дистиллированной воды, приливают 1,25 мл аммиака и 30 мл ацетона. Затем к раствору добавляют 0,1 мл пергидроля. Раствор готовят в день проведения анализа. На одну пластинку требуется 6 — 8 мл проявляющего реагента.
Для приготовления хроматографических пластинок стеклянные пластинки моют хромовой смесью, затем водопроводной и дистиллированной водой и высушивают. Перед нанесением сорбента их протирают спиртом. Для приготовления сорбционной массы 50 г оксида алюминия, просеянного через сито 100 меш, смешивают в фарфоровой ступке с 5 г сульфата кальция, переносят в колбу и прибавляют 75 мл дистиллированной воды. Смесь встряхивают 20 мин. до образования однородной массы, 8 — 10 г ее наносят на пластинку. Сушат пластинки с нанесенным сорбентом в строго горизонтальном положении в течение 12 — 18 ч при комнатной температуре, хранят в эксикаторе.
Ход анализа. Экстракция. Навеску меда (10 г) помещают в химический стакан, растворяют в 20 мл дистиллированной воды и переносят в делительную воронку. Затем приливают 90 мл гексана, встряхивают воронку в течение 2 мин. и оставляют на 5 мин. для разделения жидкостей. Нижний (водный) слой отбрасывают, а к верхнему для разрушения эмульсии добавляют 0,5 мл 96-процентного этанола. Через 5 мин. делительную воронку 4 — 5 раз энергично встряхивают и, после того как верхний слой станет светлым, нижний отбрасывают, а содержимое воронки переносят в чистый химический стакан и сушат 10 — 15 г безводного сульфата натрия 15 — 20 мин. Затем растворитель упаривают в вакуумном ротационном испарителе или в токе теплого воздуха от электротепловентилятора (температура воздуха возле чашек не должна превышать 40 °C) до небольшого объема или оставляют на ночь под вытяжкой. Досуха остаток гексана упаривают при комнатной температуре, затем содержимое растворяют в 0,5 мл гексана, количественно переносят в мерную центрифужную пробирку и наносят на пластинку.
Хроматография в тонком слое. Гексановый экстракт с помощью микрошприца или микропипетки наносят на хроматографическую пластинку на расстоянии 1,5 см от ее нижнего края. Диаметр пятна не должен превышать 1 см. Рядом с опытной пробой наносят известные количества цианокса в ацетоне. Пластинку с пробой и стандартными растворами цианокса ставят левым краем в хроматографическую камеру с гексаном. После прохождения фронта растворителя через всю пластинку ее вынимают из камеры и оставляют на несколько минут для испарения гексана. Затем пластинку хроматографируют в системе подвижных растворителей гексан-ацетон (7:1), повернув ее на 90°. После подъема растворителей до линии фронта пластинку вынимают из камеры и оставляют на воздухе на 5 — 10 мин.
После испарения растворителей пластинку ставят в камеру для опрыскивания, обрабатывают проявляющим реагентом и сразу же помещают на 10 мин. в термостат с температурой 36 - 40 °C. Цианокс проявляется в виде темно-серых пятен на белом фоне с R 0,58 - 0,60.
f
Обработка результатов анализа. Количественное определение проводят, сравнивая интенсивность окраски и величину пятна пробы и стандартных растворов цианокса. Для расчета содержания цианокса в образце (X, мг/кг) используют формулу:
AV
2
где:
A — содержание цианокса в хроматографируемом объеме стандартного раствора, мкг;
V — площадь пятна на хроматограмме стандартного раствора, кв. мм; 1
V — площадь пятна на хроматограмме пробы, кв. мм; 2
P — масса анализируемой пробы, г.
Требования безопасности. Соблюдают общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсичными веществами.