Методические указания по систематическому газохроматографическому определению микроколичеств гербицидов различной химической природы при совместном присутствии в пробах воды, почвы и растениях
(утв. Минздравом СССР 27.04.1984 № 3022-84)
Примечание
Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 № 299).
27 апреля 1984 г. № 3022-84
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО СИСТЕМАТИЧЕСКОМУ ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ГЕРБИЦИДОВ РАЗЛИЧНОЙ ХИМИЧЕСКОЙ ПРИРОДЫ
ПРИ СОВМЕСТНОМ ПРИСУТСТВИИ В ПРОБАХ ВОДЫ, ПОЧВЫ И РАСТЕНИЯХ <*>
<*> Методические указания разработаны И.Ш. Кофманом (ИФР АН УССР); М.А. Клисенко (ВНИИГИНТОКС); В.И. Кофановым (ИКХиХВ АН УССР), г. Киев.
Краткая характеристика препаратов. 2,4-Д - 2,4- дихлорфеноксиуксусная кислота. Брутто-формула C H Cl O . 8 6 2 3 Молекулярная масса 221,0. Химически чистое действующее вещество -
бесцветный порошок. Т. пл. 140,5 °C. Растворимость в воде 620 мг/л
при 25 °C, хорошо растворима в водной щелочи, спиртах, диэтиловом эфире. Сильная кислота (pK = 2,64). Остаточные количества в
a
пищевых продуктах не допускаются. МДУ в кормах для молочного скота и птицы 0,1 мг/кг, для откормочных животных и птицы — 0,6 мг/кг. ПДК в почве 0,1 мг/кг, в воде — 0,1 мг/л.
Дикамба - 2-метокси-3,6-дихлорбензойная кислота. Брутто- формула C H Cl O . Молекулярная масса 221,0. Химически чистое 8 6 2 3 действующее вещество - бесцветный порошок. Т. пл. 114 - 116 °C, давление пара 4,5 МПа (25 °C), разрушается при температуре около 200 °C. Растворимость в воде - 6,5 г/л. Хорошо растворима в большинстве органических растворителей. Остаточные количества в зерновых не допускаются. ПДК в почве 0,25 мг/кг, в воде - 15
мг/л.
Бетанал - 3-метоксикарбамидофенил-N-(3-метилфенил)-карбамат. Брутто-формула C H N O . Молекулярная масса 300,3. Общепринятое
16 16 2 4
название - фенмедифам. Химически чистое действующее вещество - бесцветные кристаллы. Т. пл. 143 - 144 °C. Растворимость в воде 4,7 мг/л при 20 °C, хорошо растворим в ацетоне, циклогексаноне, бензоле, хлороформе, метаноле, плохо - в гексане. Гидролизуется при pH 9 в течение 10 мин. на 50%. МДУ в свекле сахарной и
столовой 0,2 мг/кг. ПДК в почве 0,25 мг/кг, в воде — 0,5 мг/л.
Линурон - N-(3,4-дихлорфенил)-N'-метокси-N'-метилмочевина. Брутто-формула C H Cl N O . Молекулярная масса 249,1. Химически 9 10 2 2 2
чистое действующее вещество — бесцветные кристаллы. Т. пл. 93 — 94
°C, давление пара 2,0 МПа (24 °C). Растворимость в воде 81 мг/л (24 °C), хорошо растворим в ацетоне, умеренно - в этаноле и ароматических углеводородах, частично - в алифатических углеводородах. Стабилен в нейтральной, разрушается в кислой и щелочной средах. МДУ в картофеле, бобовых, кукурузе 0,1 мг/кг,
моркови — 0,05 мг/кг. ПДК в водоемах санитарно-бытового назначения 1,0 мг/л, для условий сельского хозяйства 0,02 мг/л. ПДК в почве 1,0 мг/кг.
Эптам - S-этил-N,N-дипропилтиокарбамат. Брутто-формула C H NOS. Молекулярная масса 189,3. Общепринятое название - ЭПТК.
9 19
Химически чистое действующее вещество - прозрачная бесцветная жидкость с ароматическим запахом. Т. кип. 127 °C (1333,2 Па), давление пара 4,5 Па (25 °C). Растворимость в воде 375 мг/л, хорошо растворим в ацетоне, этаноле, ксилоле. МДУ в сахарной и столовой свекле 0,05 мг/кг. ПДК в почве 0,9 мг/кг, в воде - 0,1
мг/л.
Тиллам - S-пропил-N-этил-N-бутилтиокарбамат. Брутто-формула C H NOS. Молекулярная масса 203,3. Общепринятое название -
10 21
пебулат. Химически чистое действующее вещество - прозрачная бесцветная жидкость с ароматическим запахом. Т. кип. 142 °C (2799,76 Па), давление пара 4,7 Па (25 °C). Растворимость в воде
60 мг/л (20 °C), хорошо растворим в ацетоне, этаноле, ксилоле. МДУ в сахарной и столовой свекле, овощах 0,05 мг/кг. ОДК в почве 0,6 мг/кг. ПДК в воде 0,01 мг/л.
Ронит - S,N-диэтил-N-циклогексилтиокарбамат. Брутто-формула C H NOS. Молекулярная масса 215,4. Общепринятое название -
11 21
циклоат. Химически чистый циклоат - прозрачная жидкость с ароматическим запахом. Т. кип. 145 °C (1333,2 Па), давление пара
830 МПа (25 °C). Растворимость в воде 75 мг/л (20 °C), растворим в ацетоне, бензоле, этаноле, ксилоле. МДУ в сахарной и столовой свекле — 0,3 мг/кг. ПДК в почве 0,8 мг/кг.
Симазин - 2-хлор-4,6-диэтиламино-симм-триазин. Брутто-формула C H ClN . Молекулярная масса 201,7. Химически чистое действующее 7 12 5 вещество - бесцветный порошок. Т. пл. 225 - 227 °C (с разрушением), давление пара 810 МПа (20 °C). Растворимость в воде 5 мг/л (20 °C); хлороформе - 900; метаноле - 400; диэтиловом эфире - 300 мг/л. МДУ во фруктах 0,2 мг/кг; винограде - 0,05; зерновых - 1,0 мг/кг. ПДК в почве 0,2 мг/кг, а в случае
последующего возделывания чувствительных культур — 0,01 мг/кг. ПДК в воде — отсутствие.
Атразин - 2-хлор-4-этиламино-6-изопропиламино-симм-триазин. Брутто-формула C H ClN . Молекулярная масса 215,7. Химически 8 14 5
чистое действующее вещество — бесцветный порошок. Т. пл. 175 — 177
°C, давление пара 0,04 МПа (20 °C). Растворимость в воде 30 мг/л (20 °C), хорошо растворим в хлороформе, метаноле, диэтиловом эфире, этилацетате. Слабо гидролизуется при 70 °C в нейтральной среде, более быстро - в кислой и щелочной средах. МДУ в овощах,
фруктах, винограде, зерновых, кукурузе 0,1 мг/кг. ПДК в почве 0,5, а при последующем возделывании чувствительных культур — 0,01 мг/кг. ПДК в воде 0,5 мг/л.
Прометрин - 2-метилтио-4,6-диизопропиламино-симм-триазин. Брутто-формула C H N S. Молекулярная масса 241,4. Химически
10 19 5
чистое действующее вещество — бесцветный порошок. Т. пл. 118 — 120
°C, давление пара 0,133 МПа (20 °C). Растворимость в воде 33 мг/л (20 °C), хорошо растворим в ацетоне, дихлорметане, гексане (5,5
г/л), метаноле, толуоле. МДУ в овощах и картофеле 0,1 мг/кг. ПДК в почве 0,5 мг/кг, ПДК в воде 3,0 мг/л.
Трефлан - 2,6-динитро-4-трифторметил-N,N-дипропиланилин. Брутто-формула C H N F O . Молекулярная масса 335,5.
13 16 3 3 4
Общепринятое название — трифлуралин. 98-процентный продукт представляет собой желто-оранжевые кристаллы. Т. пл. 48,5 — 49 °C,
давление пара 13,7 МПа (25 °C). Растворимость в воде менее 1 мг/л (27 °C), хорошо растворим во многих органических растворителях.
Неустойчив под действием УФ-облучения. МДУ в сое, табаке, капусте, моркови, луке, чесноке, томатах, баклажанах, перце 0,5 мг/кг. ОДК в почве 0,1 мг/кг. ПДК в воде 1,0 мг/л.
Пирамин - 2-фенил-5-амино-4-хлор-пиридазон-6. Брутто-формула C H ClN O. Молекулярная масса 221,6. Общепринятое название - 10 8 3 хлоридазон. Химически чистое действующее вещество - бледно-желтые кристаллы. Т. пл. 205 - 206 °C, давление пара менее 0,01 МПа (20 °C). Растворимость в воде 400 мг/л (20 °C), хорошо растворим в
метаноле и ацетоне. ОДК в почве 0,7 мг/кг. ПДК в воде 2,0 мг/л.
Принцип метода. Метод основан на газохроматографическом определении гербицидов или их модифицированных производных с помощью ДПР и ТИД после выделения из образцов ацетоном и очистки экстракта перераспределением в системах двух несмешивающихся жидкостей. При очистке препараты разделяются на группы, в которых отсутствуют соединения, имеющие близкие хроматографические характеристики. Экстракты гербицидов, способных перегоняться с водяным паром, очищают этим методом. Повышение чувствительности метода достигается химическим модифицированием: метилированием свободных карбоновых кислот и бромированием ароматических аминов, выделяющихся в результате щелочного гидролиза фениламидов.
Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 165.
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА
| Гербицид | Предел определения | Среднее значение определения | ||
| почва, мг/кг | вода, мг/л | растения, мг/кг | стандартных количеств при n = 5, % | |
| 2,4-Д | 0,01 | 0,01 | 0,04 | 79,0 +/- 3,4 |
| Дикамба | 0,01 | 0,01 | 0,04 | 85,8 +/- 2,6 |
| Бетанал | 0,005 | 0,005 | 0,02 | 65,2 +/- 4,7 |
| Линурон | 0,005 | 0,005 | 0,02 | 69,4 +/- 6,2 |
| Эптам | 0,05 | 0,05 | 0,2 | 87,4 +/- 5,9 |
| Тиллам | 0,05 | 0,05 | 0,2 | 88,0 +/- 3,5 |
| Ронит | 0,05 | 0,05 | 0,2 | 91,4 +/- 6,4 |
| Атразин | 0,05 | 0,05 | 0,2 | 94,0 +/- 3,3 |
| Прометрин | 0,05 | 0,05 | 0,2 | 92,1 +/- 2,1 |
| Симазин | 0,05 | 0,05 | 0,2 | 71,9 +/- 4,0 |
| Трефлан | 0,01 | 0,01 | 0,04 | 82,6 +/- 6,7 |
| Пирамин | 0,005 | 0,005 | 0,02 | 80,8 +/- 7,9 |
Реактивы и растворы. Стандартные растворы гербицидов в ацетоне (10 — 100 мкг/мл). Гексан ч. Ацетон ч.д.а. Этилацетат ч.д.а. Гидроксид натрия х.ч. Раствор натрия гидроксида, 1 н и 10 н водные растворы. Раствор хлороводородной кислоты, 1 н водный раствор. Сульфат натрия х.ч. безводный.
Реактивы для метилирования. Гидразин-гидрат ч.д.а. Метанол х.ч. Гидроксид калия ч. Хлороформ х.ч. Диэтиловый эфир х.ч.
Реактивы для щелочного гидролиза. Этиленгликоль х.ч. Этанол ректиф. Гидроксид калия ч.
Реактивы для бромирования. Серная кислота концентрированная х.ч. Бромид калия х.ч. Бромат калия х.ч. 2,4,6-Триметиланилин (мезидин) ч. Толуол ч.д.а. Раствор серной кислоты 1 н водный. Раствор бромида калия 20-процентный в 1 н растворе серной кислоты. Раствор бромата калия, 1-процентный водный раствор. Хранить в темной посуде на холоде. Раствор мезидина 0,2-процентный в 1 н растворе серной кислоты. Хранить в темной посуде на холоде. Сульфит натрия безводный ч.
Газы и неподвижные фазы для хроматографии. Азот особой чистоты или аргон высшего сорта. Водород. Воздух сжатый. 5% силиконовой фазы SE-30 на хроматоне N-AW-DMCS и 5% силиконовой фазы XE-60 на хроматоне N-AW-DMCS (0,16 — 0,20 мм).
Приборы, аппаратура и посуда. Газовый хроматограф «Цвет-106» или аналогичный, оснащенный ДПР и ТИД и настроенный на работу двух детекторов одновременно. В линию термоионного детектора подключается стеклянная колонка (1 м x 3 мм), содержащая 5% SE-30, а в линию детектора постоянной скорости рекомбинации — стеклянная колонка (2 м x 3 мм) с 5% XE-60. Ротационный вакуумный испаритель или аналогичный. Прибор для получения диазометана (см. рис. 6 — не приводится). Масляная баня с регулятором температуры в диапазоне 150 — 200 °C. Стандартная химическая посуда.
Подготовка к определению. Стандартные растворы гербицидов готовят из химически чистых д.в. с использованием аналитических весов, обеспечивающих точность взвешивания до 0,0001 г. Растворы хранятся в холоде в темных склянках в течение 1 мес. Пригодность стандартных растворов к использованию при анализе, а также воспроизводимость условий хроматографирования проверяют хроматографически путем сравнения с хроматограммами, полученными ранее для свежеприготовленных растворов. Для каждого стандартного раствора определяют калибровочный коэффициент, который используется для количественных расчетов (см. далее). Органические растворители необходимо перегнать, безводный сульфат натрия прокалить. Хроматографические колонки и детекторы необходимо кондиционировать перед работой не менее 1 ч.
Получение диазометана. В реакционную колбу прибора (см. рис. 6) помещают 6 г гидроксида калия, прибавляют 3 мл метанола и 3 мл гидразин-гидрата. В приемную колбу наливают 50 мл диэтилового эфира. Включают воду через холодильник. Через воронку подают хлороформ по каплям со скоростью 1 капля за 1 — 2 с.
Осторожно! Диазометан токсичен и взрывоопасен!
Окончание реакции получения диазометана определяют по появлению белых паров или бурой окраске реакционной смеси. Эфирный раствор диазометана интенсивно-желтого цвета предпочтительно применять свежеполученным, но можно хранить 3 — 5 дней в темной склянке на холоде.
Приготовление щелочного этиленгликоля. Гидроксид калия (1 г) растворяют в 1 мл смеси этанол — вода (1:1) и доводят объем до 25 мл этиленгликолем.
Проверка раствора мезидина на чистоту. Мезидин очищают от примесей, мешающих определению, хроматографированием на колонке (10 см x 5 мм), содержащей 5-см слой основной окиси алюминия. Мезидин в количестве 10 мл пропускают через колонку и отбирают первые 5 мл элюата.
К 10 мл 0,2-процентного раствора мезидина в 1 н водном растворе серной кислоты прибавляют 1 мл 20-процентного раствора бромида калия и 1 мл 1-процентного раствора бромата калия. Смесь помещают на 15 мин. в темное место. Избыток брома удаляют небольшими порциями сульфита натрия, реакционную смесь подщелачивают 15 мл 10 н раствора едкого натра и экстрагируют 5 мл толуола. При хроматографировании 5 мкл толуольного слоя не должно быть пиков, имеющих близкие параметры удерживания с бромпроизводными анилина, 3-метиланилина и 3,4-дихлоранилина.
Условия хроматографического разделения гербицидов. Расход газа-носителя через колонку в линии ДПР — 60 мл/мин., а в линии ТИД — 30 мл/мин. На поддувку ДПР расход газа-носителя составляет 160 мл/мин. Расход водорода для ТИД — 15 мл/мин., воздуха — 300 мл/мин. Для хроматографического разделения гербицидов необходимы два температурных режима:
температура испарителя 230 °C; термостата колонок — 190; термостата детекторов — 230 °C. В этих условиях время удерживания гербицидов или их производных составляет при анализе с помощью ТИД: атразин — 3,1 мин., симазин — 3,1 мин., прометрин — 5,4 мин.; при анализе с помощью ДПР: метиловый эфир 2,4-Д — 4,1 мин., метиловый эфир дикамбы — 2,1 мин., 2,4,6-трибром-3-метиланилин (бетанал) — 4,0 мин., 2,6-дибром-3,4-дихлоранилин (линурон) — 4,0 мин., 2,4,6-триброманилин (пирамин) — 3,0 мин., трефлан — 3,7 мин.; температура испарителя 190 °C, термостата колонок — 140 °C. Этот режим используется при анализе тиокарбаматов с помощью ТИД. Время удерживания: эптам — 3,2 мин., тиллам — 5,2 мин., ронит — 11,4 мин.
Отбор проб. Для анализа отбирают навески средних проб в количествах 100 мл воды, 100 г почвы известной влажности и 25 г свежесобранной зеленой массы.
Ход анализа. На рисунке 16 приведена блок-схема хода аналитического определения микроколичеств гербицидов при их совместном присутствии в пробе.
<pre class="legal-pre">┌───────────────┐ ┌──────────┐ ┌──────────────────┐ ┌────────┐
│ Кипячение │ │Ацетоновый│ │Щелочно-ацетоновый│ │1 н NaOH│
│ с ацетоном ├─>│ экстракт ├─>│ раствор │<──┤ │
└───────────────┘ └──────────┘ └────────┬─────────┘ └────────┘</pre>
\/
<pre class="legal-pre">┌─────────────────┐ ┌───────────┐ ┌──────────────────┐
│Перераспределение│ │Гексановый │ │Перераспределение │
│ c 1 н HCl │<─┤ слой │<─┤ с гексаном │
└────────┬────────┘ └───────────┘ └─────────────┬────┘
├────────────────┐ │
\/ \/ \/
┌──────────────┐ ┌──────────────┐ ┌──────────────────┐
│ Гексановый │ │ Солянокислый │ │Щелочно-ацетоновый│
│ слой │ │ слой │ │ слой │
└────────┬─────┘ └────────┬─────┘ └────────┬─────────┘
\/ \/ \/
┌──────────────┐ ┌──────────────┐ ┌──────────────────┐
│Концентрирова-│ │ Доведение │ │Перераспределение │
│ние │ │до pH 10 - 12 │ │ с этилацетатом │
└────────┬─────┘ │ c 1 н NaOH │ └────────┬─────────┘
\/ └────────┬─────┘ ┌────────┴────────┐
┌─────────────┐ \/ \/ \/
│Дистилляция с│ ┌───────────────┐ ┌───────────────┐ ┌─────────┐
│водяным паром│ │Перераспределе-│ │ Этилацетатный │ │ Водный │
│и экстракция │ │ние с гексаном │ │ слой │ │ слой │
│ гексаном │ └─────────┬─────┘ └──────┬────────┘ └───┬─────┘
└────────┬────┘ │ \/ \/
\/ \/ ┌───────────────┐ ┌─────────┐
┌──────────────┐ ┌──────────────┐ │Концентрирова- │ │Доведение│
│ Гексановый │ │ Гексановый │ │ние │ │ до pH 1 │
│ слой │ │ слой │ └──────┬────────┘ │конц. HCl│
└────────┬─────┘ └────────┬─────┘ │ └───┬─────┘
\/ \/ \/ \/</pre>
┌──────────────┐ ┌──────────────┐ ┌──────────┐ ┌─────────────────┐
│Концентрирова-│ │Концентрирова-│ │ ГЖХ, ТИД │ │Перераспределение│
│ние │ │ние │ │(симазин) │ │ с этилацетатом │
└────────┬─────┘ └────────┬─────┘ └──────┬───┘ └──────────┬──────┘
<pre class="legal-pre"> \/ \/ │ \/
┌──────────────┐ ┌──────────────┐ \/ ┌─────────────────┐
│ ГЖХ, ТИД │ │ ГЖХ, ТИД │ ┌──────────┐ │ Этилацетатный │
│ (эптам, │ │ (атразин, │ │ Гидролиз │ │ слой │
│тиллам, ронит)│ │ прометрин) │ └──────┬───┘ └──────────┬──────┘
└────────┬─────┘ └──────────────┘ \/ \/
\/ ┌──────────┐ ┌─────────────────┐
┌──────────────┐ │Бромирова-│ │Концентрирование │
│ ГЖХ, ДПР │ │ние │ └──────────┬──────┘
│ (трефлан) │ └──────┬───┘ │
└────────┬─────┘ \/ \/
\/ ┌──────────┐ ┌─────────────────┐
┌──────────────┐ │ ГЖХ, ДПР │ │ Метилирование │
│ Гидролиз │ │(бетанал, │ └──────────┬──────┘
└────────┬─────┘ │ пирамин) │ \/
\/ └──────────┘ ┌─────────────────┐
┌──────────────┐ │ ГЖХ, ДПР │
│ Бромирование │ │(2,4-Д, дикамба) │
└────────┬─────┘ └─────────────────┘</pre>
\/
| ГЖХ, ДПР (линурон) |
|---|
Рис. 16. Блок-схема аналитического определения
микроколичеств гербицидов при их совместном присутствии
в одной пробе
Подготовка проб воды к определению. К 100 мл воды, отобранной для анализа, прибавляют 5 мл 10 н раствора гидроксида натрия. Пробы почвы и растений заливают таким количеством ацетона, чтобы они были полностью покрыты растворителем, и помещают на водяную баню с температурой 70 — 75 °C. Колбы присоединяют к обратным холодильникам и выдерживают в этих условиях в течение 1 ч. После этого содержимое колб охлаждают при комнатной температуре. Ацетоновый экстракт собирают, фильтруют и упаривают с помощью ротационного испарителя до объема 50 мл. К полученному остатку прибавляют 50 мл 1 н раствора едкого натра. Дальнейшее определение для проб воды, почвы и растений проводят одинаково.
Отделение тиокарбаматов, трефлана, атразина, прометрина и линурона от других гербицидов. Щелочно-ацетоновый раствор трижды экстрагируют н-гексаном в делительной воронке по 30 мл. Все порции гексана объединяют.
Отделение тиокарбаматов, трефлана и линурона от атразина и прометрина. Гексановый экстракт, полученный на предыдущей стадии, экстрагируют тремя порциями по 25 мл 1 н раствора хлороводородной кислоты. Кислые растворы объединяют (в них содержатся симм-триазины). Тиокарбаматы, трефлан и линурон в гексановом слое.
Отделение бетанала, пирамина и симазина от 2,4-Д и дикамбы. К щелочно-ацетоновому экстракту, оставшемуся после предыдущих операций, прибавляют 100 мл 1 н раствора едкого натра и трижды экстрагируют этилацетатом по 50 мл. В объединенной этилацетатной фракции содержатся бетанал, пирамин и симазин.
Выделение 2,4-Д и дикамбы в виде свободных кислот. Щелочно-ацетоновую фракцию подкисляют концентрированной хлороводородной кислотой до pH 1,0 и экстрагируют в делительной воронке тремя порциями по 50 мл этилацетата. Объединенный этилацетатный экстракт содержит свободные формы 2,4-Д и дикамбы. Водный слой отбрасывается.
Выделение атразина и прометрина. Кислый экстракт подщелачивают 10 н раствором едкого натра (около 10 мл) и трижды экстрагируют гексаном в делительной воронке по 25 мл. Симм-триазины находятся в гексановом экстракте.
Выделение тиокарбаматов, трефлана и линурона. Гексановый экстракт, полученный ранее и содержащий указанные гербициды, упаривают на ротационном испарителе до объема 10 мл и переносят количественно на слой воды в дистилляционной колбе прибора для перегонки с водяным паром. Перегонку ведут после закипания воды в течение 1 ч. Собранный водный дистиллят трижды экстрагируют по 25 мл гексана.
Концентрирование. Органические экстракты, полученные на предыдущих стадиях, осушают безводным сульфатом натрия и упаривают с помощью ротационного испарителя.
Детектирование гербицидов без модифицирования молекул. Определение тиокарбаматов и трефлана. Тиокарбаматы анализируют с помощью ТИД, а трефлан — с помощью ДПР в условиях, описанных ранее. К упаренному экстракту прибавляют 0,2 — 0,5 мл этанола и аликвоту вводят в хроматограф. Определение симазина, атразина и прометрина. К упаренным экстрактам прибавляют по 1 мл ацетона и хроматографируют аликвоту полученного раствора с помощью ТИД в условиях, приведенных выше.
Необходимо учитывать, что около 5% атразина после перераспределения в системе гексан — ацетон — 1 н раствор едкого натра остается в водно-ацетоновой фазе, в случае больших концентраций атразина он может быть в дальнейшем ошибочно идентифицирован как симазин. Это вызвано тем, что на колонке с 5% SE-30 симазин и атразин практически не разделяются. При этом необходимо воспользоваться альтернативной колонкой, содержащей 5% XE-60. В тех же условиях, что и для колонки с SE-30, симазин и атразин имеют разные параметры удерживания.
Модифицирование молекул гербицидов. Получение метиловых эфиров 2,4-Д и дикамба. Упаривают этилацетатный экстракт и к сухому остатку прибавляют 3 — 5 мл эфирного раствора диазометана. Через 10 — 15 мин. диазометан удаляют током воздуха и вводят аликвоту в хроматограф. Определение бетанала, пирамина и линурона. Гидролитическое расщепление. В колбу с упаренной досуха пробой прибавляют 1 мл щелочного этиленгликоля, присоединяют обратный холодильник и выдерживают на масляной бане при температуре 180 °C в течение 15 мин.
Бромирование. К охлажденной смеси прибавляют 10 мл 1 н раствора серной кислоты, 0,5 мл 0,2-процентного раствора мезидина, 0,5 мл 20-процентного раствора бромида калия и 0,5 мл 1-процентного раствора бромата калия. Содержимое тщательно перемешивают и помещают на 15 мин. в темное место. По окончании бромирования избыток брома удаляют небольшим количеством безводного сульфита натрия.
Выделение бромпроизводных. Раствор подщелачивают 10 н раствором едкого натра (около 1,5 мл) и экстрагируют 5 мл толуола. Аликвотную часть хроматографируют в условиях, описанных выше.
Обработка результатов анализа. Для определения препаратов методом абсолютной калибровки прежде всего определяют калибровочный коэффициент (мм/нг) для каждого соединения по формуле:
H H H
1 1 2 n
K = — (---- + ---- + ... + ----),
n C V C V C V
1 1 2 2 n n
n — число вводимых проб стандартных растворов;
H , H ...H - высоты пиков вещества, мм; 1 2 n C , C ...C - концентрации стандартных растворов, мкг/мл; 1 2 n V , V ...V - объемы, вводимые в хроматограф, мкл. 1 2 n Содержание препарата в объекте (X, мг/кг) определяют по
формуле:
HV
1
H — высота пика препарата, мм;
V — объем анализируемой пробы, мл; 1
K — калибровочный коэффициент, мм/нг;
V — хроматографируемый объем, мкл; 2