Методические указания по определению девринола в почве, растениях и эфирных маслах методом газожидкостной хроматографии
(утв. Минздравом СССР 27.04.1984 № 3011-84)
27 апреля 1984 г. № 3011-84
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ДЕВРИНОЛА В ПОЧВЕ, РАСТЕНИЯХ И ЭФИРНЫХ МАСЛАХ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
<*> Разработаны Ю.С. Барановым, Л.А. Хилик (ВНИИЭМК).
Краткая характеристика препарата. Действующее начало девринола - альфа(нафтил-1-окси)пропионовой кислоты диэтиламид. Брутто-формула C H NO . Молекулярная масса 271,4. Общепринятое название - напропамид, 17 21 2 торговое название - дэпра. В чистом виде розовый кристаллический порошок с
т. пл. 69 °C. Растворимость в воде 70 мг/л при 20 °C, хорошо растворяется в -3 ацетоне, этаноле, хлороформе. Давление насыщенного пара 1,2 x 10 — -4 5,3 x 10 Па. Выпускается в виде смачивающегося порошка.
Принцип метода. Метод основан на извлечении девринола из растений, почвы ацетоном, очистке экстрактов — перераспределением в системе двух несмешивающихся жидкостей, дополнительной очистке растительных экстрактов на колонке с оксидом алюминия и газохроматографическом определении с помощью ТИД. Из эфирных масел препарат извлекают диметилсульфоксидом, промывают н-гексаном и определяют газожидкостной хроматографией.
Метрологическая характеристика метода. Минимально детектируемое количество 1,0 нг. Остальные параметры приведены в таблице 67.
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДЕВРИНОЛА
| Параметры | Анализируемый объект | ||
| почва | эфиромасличные растения | эфирные масла | |
| Нижний предел определения, мг/кг Среднее значение определения, % Относительное стандартное отклонение Доверительный интервал среднего (p = 0,95, n = 5), % | 0,02 88,8 5,3 +/- 14,7 | 0,04 88,7 3,8 +/- 10,6 | 0,2 83,8 5,0 +/- 13,8 |
Избирательность метода. Метод селективен. Прочие пестициды, используемые на плантациях лаванды и мяты, определению не мешают.
Реактивы и растворы. Диметилсульфоксид х.ч. Ацетон особой чистоты. н-Гексан ч., свежеперегнанный. Ацетонитрил ч. Оксид алюминия для хроматографии, ч., II степени активности. Сульфат натрия безводный х.ч. Диэтиловый эфир (для наркоза). Хроматон N-AW-DMCS (0,20 — 0,25 мм) с 5% XE-60. Хроматон N-AW-DMCS (0,20 — 0,25 мм) с 5% SE-30.
Стандартные растворы девринола в ацетоне с содержанием 100 (раствор № 1), 10 мкг/мл (раствор № 2). Растворы стабильны при хранении в холодильнике в течение 6 мес.
Приборы и посуда. Хроматограф с ТИД. Аппарат для встряхивания. Ротационный вакуумный испаритель. Делительные воронки на 250 и 500 мл. Колбы: плоскодонные, конические на 250 мл; круглодонные на 100 мл; мерные на 100 мл. Цилиндры мерные на 100 мл. Микрошприцы на 1 и 10 мкл. Пипетки на 1 и 10 мл. Колонки для хроматографии размером 100 x 15 мм.
Подготовка к определению. Органические растворители (ацетон, н-гексан) перед началом работы необходимо перегнать, сульфат натрия прокалить при температуре 300 — 400 °C. Хроматографическую колонку и детектор кондиционируют в режимных условиях в течение 2 ч.
Отбор проб. Для анализа отбирают среднюю пробу почвы массой 100 г, растений эфиромасличных культур — 50 г, эфирного масла — 10 г.
Ход анализа. Экстракция. Пробу измельченной и просеянной через сито почвы (100 г) помещают в плоскодонную колбу на 250 мл, заливают 150 мл ацетона и экстрагируют в течение 1 ч с помощью механического встряхивателя, оставляют на ночь. Экстракты фильтруют через бумажный фильтр в плоскодонную колбу на 250 мл. Остаток на фильтрате дважды промывают ацетоном порциями по 30 мл. Фильтрат упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани 50 °C до объема 10 мл. Остаток количественно переносят в делительную воронку на 500 мл, прибавляют 200 мл дистиллированной воды и реэкстрагируют девринол н-гексаном трижды порциями по 30 мл. Объединенный гексановый экстракт сушат, пропуская через 35 г безводного сульфата натрия, и концентрируют на ротационном испарителе досуха. К сухому остатку по стенкам колбы прибавляют 1 мл ацетона, закрывают и вращают колбу. В испаритель хроматографа вводят 2 мкл раствора.
Свежесрезанные эфиромасличные растения (массой 50 г) гомогенизируют со 150 мл ацетона в течение 15 — 20 мин. со скоростью 8000 об./мин., встряхивают 30 — 40 мин. Экстракты фильтруют через бумажный фильтр в колбу вместимостью 250 мл. Стакан гомогенизатора трижды промывают ацетоном порциями по 20 мл и через фильтр присоединяют смыв к основному фильтрату. Упаривают ацетон на ротационном вакуумном испарителе до 10 мл при температуре бани 50 °C. Остаток количественно с 50 мл ацетонитрила переносят в делительную воронку на 250 мл с 50 мл н-гексана. Встряхивают 1 — 2 мин. и отделяют верхний слой. Операцию проводят еще дважды. Нижний слой переносят в делительную воронку вместимостью 500 мл с 250 мл 10-процентного сульфата натрия и трижды реэкстрагируют девринол н-гексаном порциями по 50 мл. Собирают верхний слой, объединяют, высушивают, пропуская через безводный сульфат натрия, и упаривают до 5 мл на ротационном испарителе. Остаток переносят на колонку с 6 г оксида алюминия, промытую 12 мл смеси н-гексана с ацетоном (9:1). После того как раствор полностью впитается в слой сорбента, отгонную колбу смывают 5 мл смеси н-гексана с ацетоном (9:1) и переносят на колонку. Операцию повторяют 3 раза. Девринол элюируют 100 мл смеси н-гексана с ацетоном (9:1). Элюат упаривают на ротационном испарителе досуха. Остаток растворяют в 1 мл ацетона и 2 мкл вводят в испаритель хроматографа.
Навеску эфирного масла мяты, лаванды, шалфея (10 г) помещают в делительную воронку на 250 мл с 50 мл диметилсульфоксида и выдерживают 20 мин. для растворения. Прибавляют 50 мл н-гексана, встряхивают 2 мин. и отделяют верхний слой. Операцию повторяют еще дважды. Оставшийся раствор переносят в делительную воронку вместимостью 500 мл с 200 мл 10-процентного сульфата натрия, предварительно насыщенного 15 мл серного эфира, и реэкстрагируют девринол серным эфиром трижды порциями по 30 мл. Объединенные экстракты собирают, сушат, пропуская через безводный сульфат натрия, и концентрируют досуха на ротационном испарителе при температуре водяной бани 30 °C. К сухому остатку прибавляют 1 мл ацетона, встряхивают и 2 мкл вводят в испаритель хроматографа.
Условия хроматографирования. Используют стеклянные колонки спиральной формы длиной 1 м с внутренним диаметром 3 мм. Расход газа-носителя 40 мл/мин.; водорода - 16; воздуха - 400 мл/мин. Температура (°C):
испарителя — 230, термостата колонок — 190. Хроматографируемый объем 2 мкл. Линейный динамический диапазон 1 — 1000 нг. Рабочая шкала электрометра -12 100 x 10 А. Время удерживания девринола на SE-30 8 мин., на XE-60 — 11 мин.
Обработка результатов анализа. Содержание препарата в анализируемой пробе (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:
HV
1
где:
H — высота пика препарата и анализируемой пробе, мм;
V — объем анализируемой пробы, мл; 1
V — объем инъектируемой пробы, мкл; 2
K — калибровочный коэффициент, определяемый по формуле:
H H H
1 1 2 n
K = — (--- + --- + ... + ---),
n CV CV CV
1 2 n
где:
H , H , H - высоты пиков стандартного раствора девринола, мм; 1 2 n V , V , V - объемы стандартного раствора девринола, вводимые в 1 2 n
хроматограф, мкл;
C — концентрация стандартного раствора (10 мкг/мл).
Содержание микроколичеств девринола в пробах вычисляют как среднее из трех параллельных определений.
Требования безопасности. Следует руководствоваться правилами безопасности при работе с соединениями третьего класса опасности (девринол), а также с легколетучими растворителями.