Методические указания по измерению концентраций зоокумарина в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии
(утв. Минздравом СССР 24.08.1983 № 2867-83)
24 августа 1983 г. № 2867-83
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ЗООКУМАРИНА В ВОЗДУХЕ
РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
<*> Разработаны З.В. Зиракишвили, Л.Н. Татишвили (ГрузНИИГТиПЗ).
Краткая характеристика препарата. Зоокумарин - 3-(альфа- ацетонилбензил)-4-гидроксикумарин. Брутто-формула C H O .
19 16 4
Молекулярная масса 308,33. Синоним - варфарин. Белое кристаллическое вещество с т. пл. 161 °C. Хорошо растворим в ацетоне, диоксане; почти нерастворим в 95-процентном этиловом спирте, эфире. Не растворяется в воде, бензоле. Малолетуч. В воздухе может находиться в виде аэрозоля. В воздухе рабочей зоны
ПДК 0,1 мг/куб. м.
Принцип метода. Метод основан на хроматографировании зоокумарина в тонком слое силикагеля с последующим обнаружением зоны локализации препарата путем использования реакции взаимодействия с диазотированной сульфаниловой кислотой. Отбор проб проводят с концентрированием (фильтр «синяя лента»).
Метрологическая характеристика метода. Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы 5 мкг; в воздухе — 0,05 мг/куб. м (при отборе 100 л воздуха). Диапазон измеряемых концентраций 0,05 — 0,4 мг/куб. м. Граница суммарной погрешности измерения +/- 13%.
Избирательность метода. Определению не мешают другие гетероциклические соединения.
Реактивы, растворы, материалы. Зоокумарин 92-процентный. Диэтиловый эфир х.ч. Ацетон х.ч. Этиловый спирт 96-процентный. Бензол х.ч. Сульфаниловая кислота ч.д.а. Гидроксид калия х.ч. Нитрит натрия ч.д.а. Хлороводородная кислота х.ч. Карбонат натрия х.ч. Фильтры бумажные «синяя лента». Подвижная фаза бензол — ацетон (2:1).
Проявляющий реагент: раствор 0,1 г диазотированной сульфаниловой кислоты в 20 мл 10-процентного раствора карбоната натрия. Реагент готовят непосредственно перед анализом. Диазотированную сульфаниловую кислоту получают следующим образом. Сульфаниловую кислоту (25 г) растворяют в 125 мл 10-процентного раствора гидроксида калия. После охлаждения раствора добавляют 100 мл 10-процентного раствора нитрита натрия. Затем полученный раствор по каплям прибавляют к охлажденной льдом хлороводородной кислоте (40 мл хлороводородной кислоты, уд. в. = 1,19 в 20 мл воды) так, чтобы температура раствора не поднималась выше 8 °C. Полученную диазотированную сульфаниловую кислоту отфильтровывают, промывают ледяной водой, этиловым спиртом, эфиром и сушат на воздухе. Реагент хранят в темной склянке.
Стандартный раствор зоокумарина в ацетоне концентрации 200 мкг/мл. Готовят, растворяя соответствующую навеску препарата (с учетом действующего начала) в ацетоне в мерной колбе. Стандартный раствор устойчив в течение месяца.
Приборы, посуда. Аспирационное устройство. Фильтродержатели. Чашки фарфоровые диаметром 4 — 5 см. Микропипетки вместимостью 0,1; 0,2 мл с оттянутыми концами. Хроматографические пластинки «Силуфол» размером 150 x 150 мм. Камера для хроматографирования. Пульверизаторы стеклянные.
Условия отбора проб воздуха. Воздух со скоростью 10 л/мин. аспирируют через фильтр «синяя лента». Для определения 1/2 ПДК необходимо отобрать 100 л воздуха. Срок хранения отобранных проб в сухом и темном месте неограничен.
Ход анализа. Фильтр переносят в стаканчик, трижды промывают небольшими порциями ацетона (6 - 10 мл). Фильтры отжимают стеклянной палочкой. Раствор сливают в фарфоровую чашку и упаривают на водяной бане при температуре 50 °C до объема 0,1 - 0,2 мл, который количественно наносят на хроматографическую пластинку. На эту же пластинку наносят 0,025; 0,05; 0,1; 0,2 мл
стандартного раствора зоокумарина, что соответствует 5, 10, 20, 40
мкг препарата. Затем пластинку помещают в хроматографическую камеру, в которую за 20 мин. до хроматографирования была налита подвижная фаза бензол - ацетон (2:1). После подъема фронта подвижной фазы на высоту 10 см пластинку вынимают из камеры, оставляют на воздухе до полного испарения следов растворителя и затем обрабатывают проявляющим реагентом. При наличии в пробе зоокумарина на пластинке проявляются желто-оранжевые пятна с величиной R 0,86 +/- 0,1. Окраска пятен устойчива в течение 24 ч.
f
Количество препарата определяют путем измерения площади пятен стандартных растворов и пробы.
Обработка результатов анализа. Концентрацию зоокумарина в воздухе (X, мг/куб. м) вычисляют по формуле:
GS
1
G — количество препарата, найденное в пробе, мкг;
S , S - площади пятен пробы и стандарта соответственно, кв. 1 2
мм;
V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к 20 стандартным условиям, л.
Требования безопасности. Соблюдать все требования по технике безопасности при работе в химических лабораториях.