Методические указания по измерению концентраций триморфамида в воздухе рабочей зоны хроматографическими методами
(утв. Минздравом СССР 24.08.1983 № 2852-83)
24 августа 1983 г. № 2852-83
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ТРИМОРФАМИДА
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ <*>
<*> Разработаны Д.Б. Гиренко, М.А. Клисенко (ВНИИГИНТОКС).
Краткая характеристика препарата. Триморфамид - N-(1- формамидо-2,2,2-трихлорэтил)морфолин. Брутто-формула C H Cl N O . 7 11 3 2 2
Молекулярная масса 261,4. Синонимы — трифоран, фадеморф.
Триморфамид — белое кристаллическое вещество. Растворимость, г/л: в воде — 3; толуоле — 100; ацетоне — 600; этаноле — 1200. Т. пл. 116 — 117 °C.
В воздухе может находиться в виде паров и аэрозоля. ОБУВ в воздухе рабочей зоны 0,3 мг/куб. м.
Принцип метода. Метод основан на газожидкостной хроматографии с использованием ДПР и в тонком слое силикагеля с последующим обнаружением зон локализации препарата путем обработки реактивом Драгендорфа.
Пробы отбирают с концентрированием (бумажный фильтр «синяя лента», стеклянный фильтр с пористой пластинкой, вода дистиллированная).
Метрологическая характеристика метода. Нижний предел измерения триморфамида в анализируемом объеме раствора 3 нг (ГЖХ), 3 мкг (ТСХ), в воздухе — 0,06 мг/куб. м (ГЖХ), 0,3 мг/куб. м (ТСХ) (при отборе 20 л воздуха). Диапазон измеряемых концентраций 0,06 — 1 мг/куб. м (ГЖХ), 0,3 — 2 мг/куб. м (ТСХ). Граница суммарной погрешности измерения 12,6% (ГЖХ), 17,2% (ТСХ).
Избирательность метода. Определению не мешают наполнители технического препарата.
Реактивы и растворы. Ацетон ч. Безводный сульфат натрия ч. Хлороформ х.ч. Фильтры бумажные беззольные «синяя лента». Стеклянный фильтр с пористой пластинкой (фильтр Шотта) № 2 (40 мк). Стандартный раствор триморфамида № 1, содержащий 100 мкг/мл вещества, готовят растворением 10 мг препарата в мерной колбе с притертой пробкой в 100 мл ацетона. Хранят в холодильнике не более 2 мес.
К методу ТСХ. Гексан ч. Нитрат висмута основной ч. Винная кислота ч. Йодид калия х.ч. Сульфат кальция ч.д.а. Силикагель ЛС 5/40 мю + 13% гипса.
Подвижная фаза: гексан — ацетон (1:1).
Проявляющий реагент (реактив Драгендорфа). Готовят раствор А: 1,7 г основного нитрата висмута растворяют в 80 мл дистиллированной воды и добавляют 20 г винной кислоты. Раствор Б: 16 г йодида калия растворяют в 40 мл дистиллированной воды. Растворы А и Б смешивают в равных объемах. При хранении в темном прохладном месте раствор стоек в течение года. Рабочий раствор: для обработки одной пластинки отбирают 1 мл приготовленного основного раствора, прибавляют 2 г винной кислоты и разбавляют 10 мл дистиллированной воды.
К методу ГЖХ. Неподвижная фаза — 15% карбовакса 20 М на хроматоне N-AW (0,16 — 0,20 мм). Азот газообразный особой чистоты.
Стандартный раствор № 2. Для приготовления раствора с концентрацией 5 мкг/мл вносят 5 мл раствора № 1 (100 мкг/мл) в мерную колбу на 100 мл и доводят до метки ацетоном. Хранят в холодильнике не дольше двух недель.
Приборы и посуда. Электроаспиратор для отбора проб воздуха. Фильтродержатели. Поглотительный прибор Зайцева. Ротационный вакуумный испаритель для отгонки растворителей. Водяная баня. Воронки делительные на 100 и 200 мл. Колбы: конические вместимостью 100 мл; грушевидные; мерные на 25 мл. Воронки химические диаметром 6 см. Цилиндры мерные на 50 мл.
К методу ТСХ. Камера хроматографическая. Пульверизатор стеклянный. Пластинки стеклянные (9 x 12 см). Для приготовления пластинок 14 г силикагеля ЛС 5/40 мю смешивают с 1 г гипса, тщательно растирают, добавляют 40 мл дистиллированной воды, хорошо перемешивают. Полученную однородную массу наносят на 6 — 7 пластинок размером 9 x 12 см (пластинки предварительно обезжиривают).
К методу ГЖХ. Хроматограф с ДПР или ДЭЗ. Микрошприцы. Колонка стеклянная длиной 1 м с внутренним диаметром 3 мм.
Отбор проб. Воздух со скоростью 1 л/мин. последовательно аспирируют через помещенный в фильтродержатель бумажный фильтр «синяя лента» (стеклянный фильтр Шотта) и для поглощения паров — через поглотительный прибор, содержащий дистиллированную воду, в течение 20 мин. Для определения 1/2 ОБУВ следует отобрать 20 л воздуха (при определении методом ТСХ) или 10 л (при определении методом ГЖХ). Длительность хранения проб в холодильнике не более 2 сут.
Ход анализа. Бумажный фильтр помещают в коническую колбу и заливают 20 мл ацетона. Экстрагируют пестицид из фильтра в течение 30 мин. Экстракцию повторяют дважды. Объединяют ацетоновый экстракт, сушат безводным сульфатом натрия и переносят в колбу для отгонки растворителя.
Дистиллированную воду из поглотителя переносят в делительную воронку и дважды экстрагируют хлороформом порциями по 10 мл, объединяют органический слой, сушат безводным сульфатом натрия и сливают в колбу для отгонки растворителей. Отгоняют органический растворитель до объема 0,2 — 0,3 мл при температуре бани не выше 50 °C. Досуха упаривают на воздухе. Остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона и определяют методами ГЖХ и ТСХ.
Если для поглощения аэрозоля использовали стеклянный фильтр с пористой пластинкой, то пористую пластинку фильтра дважды смывают ацетоном порциями по 20 мл, тщательно обмывая поверхность фильтра, сливают ацетон через слой сульфата натрия в колбу для отгонки растворителя, концентрируют и анализируют методами ГЖХ и ТСХ.
Условия анализа методом ГЖХ. Используют колонку длиной 1 м с внутренним диаметром 3 мм. Твердый носитель хроматон N-AW (0,16 - 0,20 мм). Жидкая фаза - 15% карбовакса 20 М. Температура, °C: колонки - 170, испарителя - 200, детектора - 200. Скорость потока газа-носителя (азота особой чистоты) 70 мл/мин. Скорость протяжки диаграммной ленты 240 мм/ч. Объем вводимой пробы 5 мкл. Рабочая
-12
шкала электрометра 20 x 10 А. Линейный диапазон детектирования 0,1 — 4 нг. Абсолютное время удерживания 7 мин. 6 с.
Для дополнительной идентификации хроматографирование пробы можно проводить на колонке с неподвижной фазой 5% SE-30 при аналогичных температурных условиях. В этом случае время удерживания триморфамида составляет 3 мин. 18 с.
Количественное определение пестицида проводят по методу абсолютной калибровки.
Условия анализа методом ТСХ. Пробу, сконцентрированную до объема 0,2 — 0,3 мл, количественно наносят капиллярной пипеткой на хроматографическую пластинку так, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Центр пятна должен быть на расстоянии 1,5 см от нижнего края пластинки. Колбу с экстрактом 2 — 3 раза смывают небольшими порциями ацетона, который также наносят в центр пятна. Справа и слева от пробы наносят серию стандартных растворов пестицида, содержащих 2, 5, 7 и 10 мкг препарата.
Пластинку с нанесенными растворами помещают в хроматографическую камеру, в которую за 30 мин. до хроматографирования налита смесь гексан - ацетон (1:1). После поднятия фронта подвижного растворителя на 10 см пластинку вынимают и оставляют на несколько минут на воздухе для испарения
растворителя. После этого пластинку обрабатывают из пульверизатора
рабочим раствором реактива Драгендорфа. Триморфамид проявляется в виде пятен кирпично-красного цвета на желтом фоне. Величина R
f
0,75 +/- 0,05.
Количество препарата в пробе определяют сравнением интенсивности окраски и площади пятен пробы и стандартного раствора. Прямолинейная зависимость между площадью и интенсивностью пятна и содержанием препарата в пятне соблюдается в интервале 1 — 10 мкг.
Обработка результатов анализа. При использовании метода ГЖХ концентрацию препарата в воздухе (X, мг/куб. м) вычисляют по формуле:
GS V
1 2
G — количество препарата во введенном в хроматограф стандартном растворе, нг;
S — площадь пика препарата в исследуемом растворе пробы, кв. 1 мм;
S — площадь пика стандартного раствора препарата, введенного 2 в хроматограф, кв. мм;
V — объем раствора пробы, введенный в хроматограф, мкл; 1
V — общий объем раствора пробы, мл; 2
V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к 20 стандартным условиям, л.
При использовании метода ТСХ концентрацию препарата в воздухе (X, мг/куб. м) вычисляют по формуле:
GV
2
G — количество препарата, найденное в хроматографируемом объеме, мкг;
V — объем раствора пробы, взятый для хроматографирования, мл; 1
V — общий объем раствора пробы, мл; 2
V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к 20 стандартным условиям, л.
Требования безопасности. Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсичными веществами.