Методические указания по определению далапона в воде, почве, моркови, винограде и семенах хлопчатника методом тонкослойной хроматографии

(утв. Минздравом СССР 24.08.1983 № 2842-83)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ДАЛАПОНА В ВОДЕ, ПОЧВЕ, МОРКОВИ, ВИНОГРАДЕ И СЕМЕНАХ ХЛОПЧАТНИКА МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

---

<*> Разработаны К.Б. Баратовым, И.И. Бабаевым (Таджикский НИИ гигиены и эпидемиологии).

Краткая характеристика препарата. Далапон — натриевая соль альфа,альфа-

дихлорпропионовой  кислоты.  Брутто-формула C H O Cl .  Молекулярная  масса
                                             3 4 2  2
164,9. Далапон - белый  порошок с желтоватым оттенком. Т. пл. 174 - 176 °С.
Хорошо  растворим  в  воде,  плохо - в органических  растворителях.  Водные

растворы далапона быстро гидролизуются. ДСД 0,02 мг/кг, ПДК в воде водоемов

2 мг/л,  в воздухе рабочей зоны - 3 мг/куб. м,  в почве - 0,5 мг/кг.  МДУ в
овощах,  фруктах,  винограде - 1,0 мг/кг,  в хлопковом масле - 0,1 мг/кг, в
смородине,  крыжовнике, малине - не допускается, в чае - 0,2 мг/кг, семенах

хлопчатника — 0,2 мг/кг (временный норматив).

Принцип метода. Метод основан на переводе натриевой соли альфа,альфа-дихлорпропионовой кислоты в альфа,альфа-дихлорпропионовую кислоту путем подкисления водного раствора и экстракции кислоты органическим растворителем (диэтиловый эфир) с последующим определением в тонком слое силикагеля КСК, скрепленного гипсом. Подвижный растворитель — смесь этилового спирта с диэтиловым эфиром (1:50). Зону локализации гербицида обнаруживают, опрыскивая пластинки раствором нитрата серебра.

Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 66.

Таблица 66

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДАЛАПОНА

Параметры	Анализируемый объект
	вода	почва	морковь	виноград	семена хлопчатника
Предел определения, мг/л, мг/кг Среднее значение определения (n = 10), % Стандартное отклонение, % Доверительный интервал среднего (p = 0,95, n = 5)	0,6 91,1 +/- 1,64 +/- 7,88	0,5 90,0 +/- 2,38 +/- 8,95	0,5 89,6 +/- 3,23 +/- 7,83	0,6 88,4 +/- 2,89 +/- 6,44	0,2 87,8 +/- 3,35 +/- 12,20

Избирательность метода. Метод специфичен в присутствии в пробе трихлорацетата натрия.

Реактивы и растворы. Безводный сульфат натрия ч.д.а. Диэтиловый эфир х.ч., перегнанный. Этиловый спирт 96-процентный, ректиф. Кислота серная х.ч. Ацетон ч.д.а. Хлорид натрия х.ч. Сульфат кальция ч.д.а., прокаленный при 225 °C в течение 5 ч. Силикагель КСК, размолотый и просеянный через сито 100 меш. Нитрат серебра х.ч. Аммиак х.ч., 25-процентный водный раствор. Сорбционную массу для покрытия пластинок готовят следующим образом. Смешивают 14 г силикагеля, 1 г сульфата кальция с 50 мл дистиллированной воды, встряхивают в течение 10 — 15 мин. и равномерно наносят на 10 — 12 пластинок. Пластинки сушат на воздухе при комнатной температуре в течение суток, активируют под УФ-лампой 15 мин. и хранят в эксикаторе.

Проявляющий реагент. В мерную колбу на 250 мл помещают 2,12 г нитрата серебра, добавляют 6,3 мл аммиака, 15 мл дистиллированной воды, 5 капель пергидроля и объем раствора доводят до метки ацетоном. Готовый раствор необходимо хранить в темной посуде в холодильнике при температуре 6 — 10 °C не более 6 мес.

Стандартный раствор — альфа,альфа-дихлорпропионовая кислота (х.ч.) в смеси этилового спирта и ацетона (1:9) концентрацией 100 мкг/мл.

Приборы и посуда. Делительные воронки на 250 и 500 мл. Аппарат для встряхивания жидкости в лабораторной посуде. Ротационный вакуумный испаритель. Водяная баня. Мерные колбы на 100 и 250 мл. Вакуумный (водоструйный) насос. Микропипетки на 0,1 мл с ценой деления 0,001 мл. Камера для хроматографирования. Стеклянные пластинки размером 9 x 12 см (пластинки тщательно моют и протирают ватой, смоченной спиртом). Сито капроновое (100 меш). Пульверизатор стеклянный. Миксер или мясорубка.

Ход анализа. Экстракция. Из измельченных проб моркови и винограда отбирают 50 — 100 г, заливают 100 мл теплой (35 — 40 °C) дистиллированной воды и встряхивают в течение 15 мин. Затем воду отфильтровывают, а пробы на фильтре трижды промывают теплой дистиллированной водой порциями по 25 мл. Объединенный водный экстракт подкисляют 10 мл 5-процентного раствора серной кислоты и прибавляют хлорид натрия из расчета 30 г на 100 мл раствора. Водный экстракт охлаждают до комнатной температуры и переносят в делительную коронку. Экстракцию гербицида проводят трехкратно диэтиловым эфиром порциями по 50 мл. Объединенные экстракты сушат 10 г безводного сульфата натрия, переносят в прибор для отгонки растворителей и отгоняют до объема 0,2 — 0,3 мл. Остаток растворителя удаляют током воздуха.

Пробу воды (100 мл) помещают в делительную воронку вместимостью 250 мл, добавляют 30 г хлорида натрия и 10 мл 5-процентного раствора серной кислоты. Гербицид экстрагируют трижды диэтиловым эфиром порциями по 50 — 75 мл. Объединенный экстракт сушат добавлением 10 г безводного сульфата натрия, фильтруют через бумажный фильтр в круглодонную колбу на 250 мл. Растворитель испаряют под вакуумом.

Пробу воздушно-сухой почвы (50 г), просеянной через сито с отверстиями 0,5 мм, помещают в колбу на 500 мл, заливают 100 мл теплой (35 — 40 °C) дистиллированной воды и встряхивают 15 мин. Воду отфильтровывают, а пробу на фильтре трижды промывают теплой дистиллированной водой порциями по 25 мл. Далее экстракцию проводят так же, как экстракцию из моркови и ягод винограда.

Семена хлопчатника измельчают в ступке, помещают в колбу, трехкратно экстрагируют теплой (35 — 40 °C) дистиллированной водой порциями по 60 — 70 мл. Водный экстракт объединяют, переносят в делительную воронку или колбу на 250 мл и ставят в морозильную камеру холодильника. Спустя 40 мин. водную фракцию экстракта осторожно выпускают (сливают) и жир, застывший на стенках делительной воронки или колбочки, несколько раз промывают небольшими порциями (по 10 — 15 мл) охлажденной до 4 °C воды. Экстракцию завершают так же, как экстракцию из моркови и винограда.

    Хроматографирование  и  проявление хроматограмм.  Сухой остаток в колбе
трехкратно  ополаскивают  порциями  по  0,1  мл  элюата  (этиловый  спирт и

диэтиловый эфир в соотношении 1:4) и наносят на пластинку, отступив 1 см от

нижнего  края.  Рядом  с  пробой  на линию старта также наносят стандартный
раствор  далапона  в  различных концентрациях (от 5 до 20 мкг). Пластинку с

нанесенными пробами и стандартными растворами помещают в хроматографическую

камеру,  в  которую налито 70 мл смеси этилового спирта и диэтилового эфира
(1:50).  Когда фронт растворителя поднимется на 10 см, пластинку вынимают и
оставляют  на  несколько  минут  на  воздухе   для   испарения   подвижного

растворителя. Затем проводят активацию сорбента путем облучения УФ-светом в

течение 10 мин.  После этого пластинку опрыскивают проявляющим  реагентом и
вновь подвергают облучению.  Зоны локализации альфа,альфа-дихлорпропионовой
кислоты   обнаруживаются  в  виде  темных  пятен,   интенсивность   окраски
которых   зависит  от   концентрации  препаратов   в   пробе.  Величина  R

                                                                      f

альфа,альфа-дихлорпропионовой кислоты составляет 0,75 — 0,8.

Обработка результатов анализа. Количество гербицида определяют путем сравнения интенсивности окраски и площади пятен пробы и стандарта, площадь которого наиболее близка к площади пятна пробы. Площадь пятен измеряют планиметром или с помощью промасленной миллиметровой бумаги. Содержание препарата в анализируемой пробе (X, мг/л, мг/кг) рассчитывают по формуле:

                                 AS
                                   2

X = ---, PS 1

где:

A — содержание препарата в стандартном растворе, мкг;

    S  и S  - площади пятен соответственно  стандартного  раствора и пробы,
     1    2

кв. мм;

P — масса анализируемой пробы, мг.

При определении концентрации натриевой соли альфа,альфа-дихлорпропионовой кислоты полученный результат необходимо умножить на 1,0509 (поправочный коэффициент на натриевую соль).

Требования безопасности. Соблюдают правила безопасности, рекомендуемые при работе с химическими реактивами.

---