Временные методические указания по хроматографическому измерению концентраций сумилекса в воздухе рабочей зоны
(утв. Минздравом СССР 12.05.1983 № 2784-83)
12 мая 1983 г. № 2784-83
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ СУМИЛЕКСА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ.
Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.
O CH
| Cl | 3 H \ / | |
| \ / | ||
| // \\_N \ ___ / \ / ─── C──C | C / \ H | |
| Cl | М.м. 284,1. | |
O CH
3
Сумилекс (дициклин, действующее начало N-(3,5-дихлорфенил)-1,2-диметилциклопропан-1,2-дикарбоксимид) — белое кристаллическое вещество с температурой плавления 166 °С. Трудно растворим в воде, растворим в большинстве органических растворителей таких, как ацетон, ксилол, диэтиловый эфир, гексан. Стабилен к свету, температуре, влаге. Выпускается в виде 50-процентного смачивающего порошка. Летучесть при 20 °С — 0,005 мг/куб. м. При применении может находиться в виде аэрозоля.
I. Характеристика метода
1. Определение основано на хроматографировании сумилекса в тонком слое сорбента с последующим обнаружением зоны локализации пестицида с помощью аммиаката серебра после УФ-облучения или по реакции азосочетания.
2. Отбор проб проводится с концентрированием (бумажный фильтр «синяя лента», фильтр «АФА-ХА»).
3. Предел измерения в анализируемом объеме пробы — 0,2 — 1 мкг.
4. Предел измерения (расчетный) в воздухе — 0,04 — 0,2 мг/куб. м при отборе 5 л воздуха.
5. Диапазон измеряемых концентраций — 0,04 — 2,0 мг/куб. м (реагент аммиакат серебра), 0,2 — 2,0 мг/куб. м (реакция азосочетания).
6. Определению не мешают ХОП, ФОП.
7. Граница суммарной погрешности измерения — +/- 18,5%.
8. Предельно допустимая концентрация в воздухе рабочей зоны ориентировочно 1 мг/куб. м.
II. Реактивы, растворы, материалы
Сумилекс, 50-процентный смачивающийся порошок.
Диэтиловый эфир, хч, ГОСТ 5262-79.
Хлороформ, чда, ГОСТ 20015-74.
Кислота соляная, хч, ГОСТ 3118-77, 0,1 н раствор и 1 н раствор.
Кислота серная, хч, ГОСТ 4204-77, 25-процентный раствор.
Калий едкий, чда, ГОСТ 9286-78, 30-процентный в 50-процентном этаноле.
Натрий азотистокислый, хч, ГОСТ 5197-74.
1-Нафтиламин, чда, ГОСТ 8827-74.
N-(1-нафтил)-этилендиамин дигидрохлорид, ч, ТУ 6-09-2544-72.
Кислота азотная, хч, ГОСТ 4461-77.
Силикагель марки КСК или КСС, размер частиц 100 мм, для приготовления сорбционной массы. Испытание силикагеля: 3 — 5 г силикагеля промывают 5 — 10 мл диэтилового эфира, эфир упаривают до 0,2 — 0,5 мл и наносят на хроматографическую пластинку. Далее хроматографируют так, как описано для пестицида. Эфирный экстракт не должен содержать веществ, проявляющихся на хроматограмме аналогично сумилексу. Если силикагель содержит примеси, мешающие определению, его следует очистить. Для этого заливают его на 18 — 20 ч соляной кислотой (1:1), промывают водой и кипятят с разведенной азотной кислотой (1:1) в течение 2 — 3 ч. Промывают горячей водопроводной, а затем дистиллированной водой до нейтральной реакции промывных вод (проба лакмусовой бумажкой или метилоранжем) и до удаления в промывных водах следов хлоридов (проба азотнокислым серебром). Силикагель после промывки сушат, периодически помешивая в шкафу при температуре 130 °С в течение 6 ч, дробят и просеивают через сито 100 мк или капроновую ткань. Хранят в склянке с притертой пробкой.
Гипс или кальций сернокислый безводный, хч, ГОСТ 3210-77.
Этанол, хч, ГОСТ 18300-72, 50-процентный раствор.
Фильтры аэрозольные АФА-ХА-18 или АФА-ХА-20.
Фильтры бумажные беззольные «синяя лента», ТУ 6-09-1678-77.
Подвижная фаза: смесь гексан — хлороформ (1:3) или гексан — ацетон (3:1).
Проявляющий реактив № 1 — аммиакат серебра. 0,5 г азотнокислого серебра растворяют в 5 мл дистиллированной воды. Прибавляют 5 мл аммиака (плотность 0,9 г/куб. см) и доводят объем смеси до 100 мл ацетоном. Раствор хранят на холоде. Срок хранения — до 5 дней.
Реактивы для проведения реакции азосочетания:
№ 2 — раствор азотистокислого натрия. К 45 мл воды приливают 5 мл конц. соляной кислоты и растворяют в смеси 1 г азотистокислого натрия. Применяют свежеприготовленным;
№ 3 — раствор 1-нафтола. 2,8 г едкого калия растворяют в 50 мл воды и прибавляют 0,1 г 1-нафтола. Применяют раствор свежеприготовленным;
№ 4 — раствор 1-нафтиламина. 1 г 1-нафтиламина растворяют в 50 мл ацетона. Перед опрыскиванием смешивают с 1 н раствором соляной кислоты в соотношении 1:1;
№ 5 — раствор N-(1-нафтил)-этилендиамин дигидрохлорида. 2-процентный раствор N-(1-нафтил)-этилендиамин дигидрохлорида перед опрыскиванием с 1 н раствором соляной кислоты в соотношении 1:1.
Аммиак водный, чда, ГОСТ 3760-79.
Стандартный раствор сумилекса в диэтиловом эфире концентрации 100 мкг/мл готовят, при отсутствии химически чистого вещества, из 50-процентного смачивающегося порошка растворением 20 мг его в 100 мл эфира. Фильтруют. Растворы устойчивы в течение месяца при хранении на холоде.
III. Приборы и посуда
Испаритель ротационный марки ИР-1М с набором колб, ТУ 2811-917-74.
Колбы грушевидные для отгонки растворителя, ГОСТ 13394-72.
Колбы мерные, цилиндры, ГОСТ 1770-74.
Пипетки, микропипетки, ГОСТ 20292-74.
Стаканы химические емкостью 50 — 100 мл, ГОСТ 13394-72.
Стеклянные капилляры для нанесения проб на пластинку.
Камера для обработки хроматограмм.
Пластинки для хроматографии «Силуфол» размером 150 х 150 мм.
Встряхиватель (Шутель-аппарат или др.).
Приготовление пластинок с тонким слоем силикагеля. 35 г силикагеля смешивают с 2 г гипса, растирают в фарфоровой ступке, приливают небольшими порциями 90 мл дистиллированной воды. Полученную однородную массу наносят тонким слоем на 10 пластинок размером 9 х 12 см. Сушат при комнатной температуре 8 — 10 ч. Хранят в эксикаторе.
Кварцевая лампа — источник УФ-света типа ОКН-11, О-139 и др.
IV. Условия отбора проб воздуха
5 л исследуемого воздуха со скоростью 5 л/мин. протягивают через фильтр АФА-ХА или бумажный «синяя лента». Пробы можно хранить на холоде в течение недели.
V. Условия анализа
Фильтр извлекают из фильтродержателя, помещают в химический стакан или бутылочку с крышкой, заливают 6 мл эфира и оставляют на 30 мин. или встряхивают 15 мин. Экстракт сливают в колбу прибора для отгонки растворителя. Сюда приливают промывные порции эфира, которые получают, встряхивая дважды фильтр с 5 мл эфира в течение 1 минуты. Фильтр тщательно отжимают. Отгоняют растворитель до объема раствора 0,2 — 0,3 мл. Наносят на хроматографическую пластинку на линию старта, посередине. Слева и справа от пробы наносят стандартные растворы сумилекса, содержащие от 0,2 до 10 мкг пестицида в зависимости от предполагаемого содержания его в пробе воздуха и от применяемого проявляющего реагента. Пластинку помещают в хроматографическую камеру, куда предварительно наливают подвижную фазу. Край пластинки должен быть погружен в растворитель не более чем на 0,5 см. Элюируют хроматограмму на высоту 10 см. Затем пластинку вынимают из камеры и подсушивают на воздухе в вытяжном шкафу до удаления следов растворителей. Далее обрабатывают одним из прочих реагентов.
Если используют для анализа хроматографические пластинки «Силуфол», то для проявления зоны локализации сумилекса можно применять реактив № 1. Для этого пластинку помещают под ультрафиолетовую лампу на расстоянии 10 — 12 см на 5 мин. Затем опрыскивают проявляющим реактивом № 1 и после удаления следов аммиака снова помещают в УФ-свет. Через 0,5 — 1 мин. проявляются черно-коричневые пятна сумилекса. Минимально определяемое количество пестицида 0,2 мкг.
Для проведения реакции азосочетания проводят щелочной гидролиз. Для этого пластинки обрабатывают 30-процентным раствором едкого калия в 50% этаноле, осторожно увлажняя поверхность, и помещают на 20 мин. в сушильный шкаф при температуре 150 °С. Охлажденные пластинки опрыскивают реактивом № 2, а через 1 — 2 мин. реактивом № 3 или № 4, или № 5. При этом в зоне локализации сумилекса проявляется окрашенное пятно сиреневого (N 5, предел обнаружения — 0,5 мкг), оранжево-желтого (N 3, предел обнаружения — 1 мкг), темно-розового (N 4, предел обнаружения — 1 мкг) цвета.
Если используют для анализа пластинки со слоем силикагеля КСК, то сумилекс проявляют реактивом № 1 (порядок применения такой же, как для «Силуфола») или с помощью реакции азосочетания после кислородного гидролиза. Для этого пластинки обрабатывают 25-процентным раствором серной кислоты и помещают в сушильный шкаф на 20 мин. Через 20 мин. после охлаждения на воздухе обрабатывают реактивом № 2. Через 1 — 2 мин. — одним из реактивов № 3, 4, 5. Тотчас проявляется пятно, окрашенное в желто-оранжевый цвет (N 3), темно-розовый (N 4) и сиреневый (N 5) цвет. Максимально определяемое количество сумилекса — 1 мкг.
Величина R 0,4 — 0,6. Экстрактивные вещества фильтров не проявляются f или имеют другую величину R , определению пестицида не мешают. Окраска f пятен устойчива несколько дней.
Из пятен на хроматограммах стандартов выбирают пятно сумилекса, близкое по окраске и площади соответствующему пятну на хроматограмме пробы. Измеряют с помощью прозрачной или промасленной миллиметровой бумаги площади этих пятен.
Концентрацию сумилекса (X) в мг/куб. м в воздухе вычисляют по формуле:
G х S
пр
S х V
ст 20
где:
G — количество препарата на хроматограмме стандарта, мкг;
S — площадь пятна пробы, кв. мм; пр
S — площадь пятна на хроматограмме стандарта, кв. мм; ст
V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к 20 стандартным условиям, л.
Количественную оценку можно провести с помощью денситометра «БИАН-170». Для анализа хроматограмм, обработанных реактивом № 1, используют светофильтр № 1 (фиолетовый), скорость каретки — 60 мм в мин., кимографа — 30 мм/мин. Градуировочную шкалу строят в интервале концентраций сумилекса 0,25 — 10 мкг. Измеряют на электрофореграммах площади пиков (или вырезают и взвешивают на аналитических весах), соответствующие определенным концентрациям, и строят градуировочный график зависимости «Площадь — концентрация» (масса — концентрация). Концентрацию сумилекса на хроматограмме пробы определяют по градуировочному графику после определения площади (массы) пика на электрофореграмме пробы.
Концентрацию в воздухе вычисляют по формуле:
A
где:
X — концентрация сумилекса, мг/куб. м;
A — концентрация сумилекса, найденная по градуировочному графику;
V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к 20 стандартным условиям, л.
VI. Требования безопасности
Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях.
VII. Разработчики
Киевский НИИ гигиены труда и профзаболеваний, г. Киев.