Временные методические указания по хроматографическому измерению концентраций фекама-трибуфона в воздухе рабочей зоны
(утв. Минздравом СССР 12.05.1983 № 2782-83)
12 мая 1983 г. № 2782-83
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ФЕКАМА-ТРИБУФОНА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ.
Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.
CH O O
| 3 \ |
|---|
P-CH-CCl
| 3 |
|---|
CH O O-CO-C H М.м. 327,5. 3 3 7
Фекама-трибуфон (бутонат) — активное вещество 0,0-диметил-(1-бутирокси-2,2,2-трихлорэтил)фосфонат.
Технический продукт - прозрачная маслянистая жидкость от желтого до желто-коричневого цвета. Нерастворим в воде, растворим в большинстве органических растворителей. Устойчив в нейтральной и слабокислых водных
-3
средах. Давление паров - 4 х 10 мм рт. ст. при 20 °С, летучесть - 71,7 мг/куб. м при 20 °С. ЛД для крыс - 1780 мг/кг.
50
I. Характеристика метода
1. Определение основано на: а) газожидкостной хроматографии фекама-трибуфона с детектором постоянной скорости рекомбинации. Избирательность метода обеспечивается использованием различных подвижных фаз. Для дополнительной идентификации определение можно проводить на термоионном детекторе;
б) хроматографировании препарата в тонком слое силикагеля с последующим обнаружением зон локализации препарата путем обработки растворами различных проявляющих реагентов: 1) последовательная обработка пластинок 1-процентным раствором 4-нитробензил-пиридина в ацетоне, затем 10-процентным раствором тетраэтиленпентамина в ацетоне; 2) раствором азотнокислого серебра в ацетоне с последующим облучением УФ-светом.
2. Отбор проб воздуха с концентрированием (бумажный фильтр «синяя лента», смесь ацетон — вода (7:3)).
3. Предел измерения в анализируемом объеме пробы -
4. Предел измерения в воздухе — 0,4 мг/куб. м.
5. Диапазон измеряемых концентраций -
6. Определению не мешают другие фосфорорганические пестициды.
7. Граница суммарной погрешности измерения -
8. <a id="p100024"></a>ПДК фекама-трибуфона в воздухе не установлен. ОБУВ = 1,2
расч
мг/куб. м.
II. Реактивы, растворы, материалы
Основной стандартный раствор фекама-трибуфона, содержащий 500 мкг/мл действующего вещества, готовят растворением 50 мг препарата в 100 мл ацетона в мерной колбе с притертой пробкой. Хранят в холодильнике в течение 2-х месяцев.
Стандартный раствор фекама-трибуфона, содержащий 10 мкг/мл действующего вещества в ацетоне. Хранят в холодильнике в течение 2-х недель.
Бензол, ч., ГОСТ 5955-75.
н-Гексан, х.ч., ТУ 6-09-3375-78.
Натрий сернокислый безводный, ч., ГОСТ 4166-76.
Хлороформ, х.ч., ГОСТ 20015-74.
Диэтиловый эфир, х.ч., ГОСТ 6262-79.
№ 1. а) 1-процентный раствор 4-(п-нитробензил)пиридина в ацетоне;
б) 10-процентный раствор тетраэтиленпентамина в ацетоне.
№ 2. Раствор азотнокислого серебра: 0,5 г азотнокислого серебра растворяют в 5 мл дистиллированной воды, прибавляют 7 мл 25-процентного аммиака, смесь доводят до 100 мл ацетоном.
Подвижный растворитель: бензол — ацетон (3:1).
Азотнокислое серебро, х.ч., ГОСТ 1277-81.
Аммиак водный, ч., ГОСТ 3760-79.
Носитель хроматон N-AW (80 — 100 меш) с 5% SE-30 или QF-17.
Азот газообразный особой чистоты, содержание кислорода не более 0,003%, ГОСТ 9293-74.
III. Применяемая посуда и приборы
Электроаспиратор для отбора проб воздуха, ТУ 64-1-862-77.
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.
Склянка для промывания и очистки газов (склянка Дрекселя) ТУ-25-11-1062-75.
Воронки делительные емк. 250 мл, ГОСТ 1770-74.
Колбы конические со шлифами емк. 100 мл, ГОСТ 10394-72.
Колбы грушевидные емк. 50, 100 мл, ГОСТ 10394-72.
Колбы мерные на 100 мл, ГОСТ 1770-74.
Фильтры бумажные обеззоленные «синяя лента», ТУ 6-09-1678-77.
Пипетки на 0,1 мл, ГОСТ 20292-74.
Цилиндры мерные емк. 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74.
Камера хроматографическая, ГОСТ 10565-75.
Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 10391-74.
Пластинки «Силуфол» (Chemapol, ЧССР).
Газовый хроматограф с детектором по захвату электронов (детектором постоянной скорости рекомбинации — ДПР) марки «Цвет-106», «Цвет-110», «Газохром 1109» и др.
Колонка стеклянная длиной 1 м, внутренний диаметр 3 мм.
IV. Условия отбора проб воздуха
Воздух со скоростью 0,5 л/мин. последовательно аспирируют через помещенный в фильтродержатель бумажный фильтр «синяя лента» и для поглощения паров через склянку Дрекселя со смесью ацетон — вода 100 мл (7:3). Отбирают 10 л воздуха. Длительность хранения проб в холодильнике не более 2 дней.
V. Условия анализа
Бумажные фильтры, содержащие аэрозоль, из фильтродержателя помещают в коническую колбу и заливают 40 мл ацетона. Экстрагируют пестицид из фильтра в течение 1 часа. Экстракцию повторяют трижды. Экстракт сушат сернокислым натрием безводным (20 г) и сливают в колбу для отгонки растворителя. Смесь ацетон-вода из поглотителя переносят в делительную воронку, прибавляют 100 мл дистиллированной воды и реэкстрагируют препарат дважды по 30 мл хлороформа. Объединенный хлороформный экстракт сушат сернокислым натрием безводным (20 г) и сливают в колбу для отгонки растворителя, объединяя с экстрактом из фильтров. Отгоняют растворитель под вакуумом при температуре бани 40 °С до объема 0,2 — 0,3 мл. Досуха упаривают на воздухе. Остаток в колбе растворяют в 1 мл гексана и хроматографируют (ГЖХ и ТСХ).
Определение методом газожидкостной хроматографии
Носитель — хроматон N-AW (0,16 — 0,20 мм).
Ввод через самоуплотняющуюся мембрану.
Условия анализа приведены в таблице 1.
| Хроматографические параметры | ДПР | ДПР | ТИД |
|---|---|---|---|
| Неподвижная фаза | 5% SE-30 | 4% SE-30 + 6% QF-1 | 5% SE-30 |
| Температура колонки | 180 °С | 180 °С | 200 °С |
| Температура испарителя | 220 °С | 210 °С | 210 °С |
| Температура детектора | 220 °С | 230 °С | 210 °С |
| Скорость азота, мл/мин. | 70 | 70 | 22 |
| Время удерживания | 2 мин. | 3 мин. | 2 мин. 23 с |
| Минимально детектируемое количество | 2 нг | 0,4 нг | 4 нг |
| Линейный диапазон детектирования | 2 — 30 нг -12 | 1,25 — 10 нг | 4 — 20 нг |
| Шкала электрометра | -20 х 10 А |
Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки. Для этого перед и после анализа проб вводят в хроматограф по 5 мкл стандартного раствора препарата № 2, измеряют высоту пиков и вычисляют среднее арифметическое из 5 определений. Если при введении в хроматограф аликвотной части (5 мкл) конечного экстракта получают слишком большие пики или происходит «зашкаливание», что свидетельствует о наличии большого количества анализируемого вещества, готовят более разбавленные растворы, добавляя в конечный раствор пипеткой замеренное количество гексана.
Концентрацию препарата в мг/куб. м (Х) в воздухе вычисляют по формуле:
G х H х V
2 1
H х V х V
1 20
где:
G — количество препарата в стандартном растворе, введенном в хроматограф, мкг;
H — высота пика препарата в стандартном растворе, мм; 1
H — высота пика препарата в анализируемом растворе, мм; 2
V — объем раствора пробы, введенный в хроматограф, мл;
V — общий объем раствора пробы, мл; 1
V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным 20 условиям, л.
Определение методом тонкослойной хроматографии
Экстракт после газожидкостного определения доупаривают до 0,2 — 0,3 мл и количественно наносят при помощи капиллярной пипетки на хроматографическую пластинку «Силуфол» так, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Центр пятна должен быть на расстоянии 1,5 см от нижнего края пластинки. Колбочку с экстрактом 2 — 3 раза омывают небольшими порциями эфира, который также наносят в центр первого пятна. Справа и слева от пробы на расстоянии 2 см от пробы наносят стандартные растворы, содержащие 3,5 или 10 мкг действующего вещества препарата.
Пластинку с нанесенными растворами помещают в хроматографическую камеру, в которую налита смесь растворителей бензол — ацетон в соотношении 3:1. Время насыщения камеры 15 — 20 минут. Край пластинки не должен быть погружен в раствор более чем на 0,5 см. После поднятия фронта подвижного растворителя на 10 см пластинку поднимают и оставляют на несколько минут на воздухе для испарения подвижного растворителя. Затем пластинку обрабатывают одним из проявляющих реактивов:
-
1-процентным раствором 4-(п-нитробензил)пиридина, нагревают пластинку в течение 5 минут при температуре 110 °С, затем обрабатывают 10-процентным раствором тетраэтиленпентамина. Фекама-трибуфон проявляется в виде ярких фиолетово-синих пятен на белом фоне. Нижний предел обнаружения — 0,5 мкг;
В качестве подвижного растворителя можно использовать смесь гексан- ацетон (1:1), R = 0,68 +/- 0,05.
f
Количество препарата в пробе определяют сравнением интенсивности окраски и площади пятен пробы и стандартного раствора. Измерение площади проводится с помощью миллиметровой бумаги. Строится калибровочный график зависимости количества препарата (в мкг) от площади пятна (кв. мм). Прямолинейная зависимость между площадью пятна и содержанием препарата в пятне соблюдается в интервале 1 — 10 мкг. Если содержание препарата в пробе превышает 10 мкг, то для нанесения на пластинку необходимо брать аликвотную часть экстракта (0,1 — 0,2 мл) параллельной пробы.
Концентрацию препарата в мг/куб. м воздуха (X) вычисляют по формуле:
G х V
1
где:
G — количество препарата, найденное в анализируемом объеме раствора, мкг;
V — объем пробы, взятый для хроматографирования, мл;
V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным 20 условиям, л.
VI. Требования техники безопасности
Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсическими веществами.