Методические указания по определению тотрила в луке зеленом и репчатом методом тонкослойной хроматографии

(утв. Минздравом СССР 12.05.1983 № 2488-83)

12 мая 1983 г. № 2488-83

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТОТРИЛА В ЛУКЕ ЗЕЛЕНОМ И РЕПЧАТОМ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

---

<*> Разработаны К.В. Криволуцким, С.В. Тулуповой (ВНИИССОК).

    Краткая    характеристика    препарата.    Тотрил   -   4-гидрокси-3,5-
дийодбензонитрил.  Выпускается в форме 25-процентного концентрата эмульсии.
Брутто  -  формула  C H OI N.   Молекулярная   масса   370,9.  Общепринятое
                     7 3  2
название  -  йоксинил.  Твердое  воскообразное  вещество   кремового  цвета
с т. пл. 212 - 213,5 °C.  Практически  нерастворимо  в  воде. Растворимость
(г/л):  в ацетоне - 100,  метаноле - 90,  ксилоле - 500.  Тотрил уничтожает
преимущественно однолетние двудольные сорняки: щирицу, лебеду, марь  белую,

пастушью сумку, звездчатку и др. ДСД 0,04 мг/кг, МДУ в луке 0,1 мг/кг.

Принцип метода. Метод основан на хроматографии в тонком слое после извлечения тотрила из лука гексаном.

Метрологическая характеристика метода. Пропорциональная зависимость между площадью пятна и массой тотрила сохраняется в интервале 0,5 — 10 мкг. Предел определения 0,02 мг/кг. Среднее значение определения 77%. Стандартное отклонение 6,6%. Доверительный интервал (при p = 0,95, n = 9) 5,07.

Избирательность метода. Метод специфичен, другие препараты в данных условиях хроматографирования определению не мешают.

Реактивы и растворы. н-Гексан ч. Пероксид водорода х.ч. Сульфат натрия безводный. Кислота уксусная 98-процентная, х.ч. Ксилол ч. Амиловый эфир уксусной кислоты ч. Пластинки «Силуфол» (связующее — крахмал). Аммиак водный ч.д.а. Железо треххлористое х.ч. Стандартный раствор: 10 мг тотрила растворяют в мерной колбе на 100 мл в гексане. Раствор соответствует концентрации 100 мкг/мл. Хранят в склянке с пришлифованной пробкой на холоде в течение 2 мес. Проявляющие реагенты: 10-процентный раствор пероксида водорода, 5-процентный раствор треххлористого железа.

Приборы и посуда. Ротационный испаритель. Колбы: конические со шлифом на 100 мл; грушевидные на 250 мл. Воронки делительные. Источник УФ-света (кварцевая лампа мощностью 250 Вт). Воронки. Пробирки. Капилляры стеклянные. Микрокомпрессор МК-Л.

Отбор проб. Пробу лука (100 — 200 г) очищают, измельчают ножом или на мясорубке. Зеленый лук измельчают, предварительно вымыв и просушив. Отбирают среднюю пробу массой 25 — 50 г.

Ход анализа. Экстракция и очистка экстракта. Измельченную навеску 25 — 50 г помещают в коническую колбу, заливают гексаном (25 — 50 мл) на ночь. Одновременно заливают пробу контрольного лука, в которую вносят 10 мкл стандартного раствора, что соответствует внесению 1 мкг препарата в контрольную пробу.

Гексановый экстракт отделяют от массы фильтрованием через бумажный фильтр со слоем безводного сульфата натрия (5 г). Колбу и фильтр трижды промывают гексаном порциями по 5 — 10 мл. Объединенный экстракт упаривают на ротационном испарителе и досушивают струей воздуха. Сухой остаток растворяют в смеси 10 мл муравьиной кислоты и 2 мл этанола, добавляют 3 мл ксилола, взбалтывают, слой ксилола отделяют, упаривают до объема 0,5 мл. Затем хроматографируют. Аналогично обрабатывают контрольную пробу.

Хроматографирование. Для каждой пробы вырезают отдельную пластинку «Силуфол» высотой 10 — 14 см, шириной 2 см. В ее нижней части загибают бортик высотой 5 мм. Пробу объемом 0,5 мл вносят в углубление за бортиком капилляром или микропипеткой порциями по 0,10 — 0,15 мл. Внесение повторяют периодически по мере впитывания. Высота поднятия ксилольного экстракта 6 — 7 см.

    Основная  часть  коэкстрактивных  веществ остается на старте. Некоторая
часть  коэкстрактивных  веществ  по мере  продвижения ксилольного экстракта
движется с R  0,3 - 0,5. Тотрил движется с фронтом ксилольного экстракта.

        f

После нанесения пробы пластинки слегка подсушивают в сушильном шкафу при температуре 80 — 100 °C в течение 1 — 2 мин. Затем помещают в эксикатор над 25-процентным раствором аммиака. Выдерживают пластинки в атмосфере аммиака в течение 5 — 10 мин.

    Далее  пластинки  облучают в УФ-свете в течение  30 мин.  на расстоянии
350 мм от лампы мощностью 250 Вт.  Тотрил под действием  аммиака и УФ-света

образует продукты распада, способные давать окрашенное пятно и перемещаться с R 0,95 — 1,0 при развитии хроматограммы водой. f

Хроматографируют дистиллированной водой так, чтобы высота подъема воды на 5 — 10 мм превышала высоту подъема экстракта. Нижний край пластинки (20 — 30 мм), содержащий оставшуюся на старте основную массу коэкстрактивных веществ, перед хроматографированием обрезают. Оставшуюся часть пластинки высушивают в сушильном шкафу при 80 — 100 °C в течение 3 — 5 мин. Хроматографирование и подсушивание пластинки повторяют. Высота фронта растворителя (воды) в обоих случаях должна быть одинаковой. Затем хроматограмму проявляют. Рекомендуется не опрыскивать пластинку проявляющим реагентом, а осторожно смачивать небольшими порциями (0,1 — 0,2 мл) 10-процентного раствора пероксида водорода на расстоянии 20 — 30 мм от предполагаемого места концентрации тотрила.

Можно проявлять тотрил раствором треххлористого железа. При наличии тотрила в пробе появляется сине-фиолетовая полоска. Контрольная проба обрабатывается параллельно в идентичных условиях.

Обработка результатов анализа. Площади и интенсивность окраски пятен пробы и стандартных растворов сравнивают спустя 20 — 30 мин. после проявления. Содержание тотрила (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:

                                  A

X = -, P

где:

A — количество препарата, найденное в анализируемой пробе, мкг;

P — масса пробы, г.

---