Методические указания по изучению кожно-резорбтивного действия химических соединений при гигиеническом регламентировании их содержания в воде

(утв. Минздравом СССР 01.04.1981 № 2377-81)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗУЧЕНИЮ КОЖНО-РЕЗОРБТИВНОГО ДЕЙСТВИЯ ХИМИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ ПРИ ГИГИЕНИЧЕСКОМ РЕГЛАМЕНТИРОВАНИИ ИХ СОДЕРЖАНИЯ В ВОДЕ

Методические указания предназначены для специалистов, занимающихся экспериментальным обоснованием ПДК вредных веществ в воде водных объектов, а также для органов санитарно-эпидемиологической службы, контролирующих санитарное состояние водоемов рекреационно-оздоровительного водопользования, в том числе морских вод. Они определяют общие принципы и методические особенности изучения и регламентации в воде водных объектов химических веществ кожно-резорбтивного действия с целью повышения надежности гигиенических нормативов в интересах охраны здоровья населения.

Методические указания разработаны Львовским медицинским институтом Минздрава УССР и Институтом общей и коммунальной гигиены им. А.Н. Сысина АМН СССР при участии и использовании материалов НИИ гигиены труда и профзаболеваний Минздрава ГССР, Новосибирской обл. СЭС, ВНИИГИНТОКС Минздрава СССР, Киевского НИИ гигиены труда и профзаболеваний Минздрава УССР, Львовского медицинского института Минздрава УССР.

1. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

1.1. Настоящие Методические указания являются дополнением к «Методическим указаниям по разработке и научному обоснованию предельно допустимых концентраций вредных веществ в воде водоемов» (N 1296-75) и «Методическим указаниям по применению расчетных и экспресс-экспериментальных методов при гигиеническом нормировании химических соединений в воде водных объектов» (N 1943-78). В развитие требований, изложенных в названных документах, при проведении токсикологических исследований дополнительно предусматривается качественная (все вещества) и количественная (по показаниям) оценка кожно-резорбтивного действия регламентируемых веществ.

1.2. Выявление кожно-резорбтивного действия является обязательным элементом исследований по регламентации содержания химических веществ в воздухе рабочей зоны, учитывается при установлении абсолютной величины соответствующих ПДК и оговаривается в их официальных перечнях. Пометку «опасно при поступлении через кожу» имеет около 25% веществ, ПДК которых включены в ГОСТ 12.1.005-76 «Система стандартов безопасности труда. Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования». Этой величиной примерно оценивается и общее количество химических соединений, в отношении которых может потребоваться углубленное изучение кожно-резорбтивного действия в плане гигиены воды и санитарной охраны водоемов хозяйственно-питьевого и рекреационно-оздоровительного назначения.

1.3. Необходимость специального изучения кожно-резорбтивного действия веществ при их поступлении в организм из водной среды вытекает из анализа современных научных данных, а также результатов поисковых исследований, проведенных во Львовском медицинском институте при гигиеническом нормировании в воде водоемов инсектоакарицида циодрина и полупродуктов его производства и в Институте общей и коммунальной гигиены им. А.Н. Сысина АМН СССР при гигиенической оценке термальных вод, используемых в системах горячего водоснабжения, и загрязненных морских вод, используемых в рекреационно-оздоровительных целях:

а) доказана проницаемость кожи для воды и водных растворов (эмульсии) веществ, относящихся к различным классам химических соединений, причем некоторые из них всасываются из водных смесей лучше, чем чистые вещества;

б) увлажнение кожи, повышение температуры воды (до температуры тела человека и выше) и комбинация этих факторов обычно существенно усиливают всасывание веществ через кожу;

в) погружение тела в воду (водоем, плавательный бассейн, ванна) или обливание (душ) сопряжены с резким увеличением площади контакта (практически до 100% поверхности тела против 5 — 10% в условиях профессионального воздействия); в то же время многие соединения, изученные в интересах гигиены труда, имеют низкие кожно-оральные коэффициенты уже при минимальной площади контакта;

г) в сопоставлении с потенциальной опасностью кожно-резорбтивного действия веществ в условиях профессионального воздействия существует повышенная потенциальная опасность интоксикации при купании детей (в особенности первого года жизни) в связи с большей всасываемостью и часто более высокой токсичностью веществ для детского организма;

д) ряд химических соединений способен к временному депонированию в толще кожи, что при повторном воздействии может повлечь за собой относительное усиление их кумулятивного действия;

е) исследование кожно-резорбтивного действия ряда веществ в экспериментальных условиях, приближенных к реальным условиям водопользования, подтвердило возможность относительного увеличения токсичности и степени выраженности кумулятивных свойств отдельных веществ при перкутанном поступлении по сравнению с пероральным введением.

1.4. Гигиеническая целесообразность изучения кожно-резорбтивного действия веществ с ориентацией на возможное поступление из воды, подаваемой централизованными системами хозяйственно-питьевого водоснабжения, определяется требованиями ГОСТа 2874-73 «Вода питьевая», согласно которому (п. 1.5.3) допускается присутствие в воде химических веществ, являющихся промышленными и сельскохозяйственными загрязнителями водоисточников, в концентрациях, не превышающих нормативы, установленные Министерством здравоохранения СССР для источников централизованного водоснабжения.

1.5. Материалы, характеризующие кожно-резорбтивное действие химических веществ, регламентируемых в воде водных объектов, в объеме требований настоящих Методических указаний, включаются в отчет о выполненной работе, оформляемый в соответствии с ГОСТом 19600-74 «Отчет о научно-исследовательской работе. Общие требования и правила оформления». Один экземпляр отчета должен направляться в Секцию гигиены воды и санитарной охраны водоемов Проблемной комиссии АМН СССР «Научные основы гигиены окружающей среды» для рассмотрения в установленном порядке и последующего хранения в библиотечном фонде Секции.

2. ПРИНЦИПЫ ГИГИЕНИЧЕСКОЙ ОЦЕНКИ КОЖНО-РЕЗОРБТИВНОГО ДЕЙСТВИЯ ВЕЩЕСТВ ПРИ ИХ ПОСТУПЛЕНИИ В ОРГАНИЗМ ИЗ ВОДНОЙ СРЕДЫ

2.1. Поступление вещества из водной среды через кожу представляет собой такую же объективную реальность, как и любой другой путь поступления, и его гигиеническое значение подлежит независимой оценке на основе соответственно адаптированных общих принципов регламентации веществ при раздельном и одновременном поступлении различными путями. Для некоторых веществ, нормируемых в воде водных объектов, количественная характеристика их кожно-резорбтивного действия может оказать решающее влияние на величину ПДК.

2.2. Целесообразность экспериментального изучения кожно-резорбтивного действия конкретного вещества определяется на основании данных литературы, включая официальные перечни ПДК вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а для органических соединений — сведения о коэффициентах распределения «октанол/вода». Исследованию подлежат в первую очередь вещества, предназначенные для широкого внедрения в народное хозяйство.

2.3. Изучение кожно-резорбтивного действия регламентируемого вещества целесообразно проводить параллельно изучению его токсических свойств при пероральном введении. Последнее проводится в полном объеме, предусмотренном методическими документами, названными в п. 1.1, и играет определяющую роль в общей токсикологической характеристике исследуемого вещества.

2.4. При обосновании ПДК веществ, способных всасываться через кожу, сохраняет силу принцип лимитирующего признака вредности, но концентрация, принимаемая во внимание по санитарно-токсикологическому признаку, должна быть установлена с учетом кожно-резорбтивного действия нормируемого вещества и возможности его одновременного поступления через желудочно-кишечный тракт и через кожу.

2.5. Основная токсикометрическая информация о кожно-резорбтивном действии изучаемого вещества должна быть получена в эксперименте на лабораторных животных при единых условиях постановки опытов, наиболее адекватных реальным условиям водопользования.

2.6. Учитывая дополнительный характер соответствующих исследований, а также существенно более высокую проницаемость кожи лабораторных животных по сравнению с кожей человека, содержание и объем этих исследований могут быть сведены к минимуму, абсолютно необходимому для оценки опасности вещества при поступлении из воды через кожу. Абсолютно необходимыми являются: определение токсичности и степени кумуляции изучаемого вещества при кожном пути поступления, а также исследование его аллергенных свойств при внутрикожной сенсибилизации. Общие требования к проведению аллергологических исследований принимаются в соответствии с «Методическими указаниями по изучению аллергенного действия веществ, загрязняющих водоемы» (N 2185-80).

2.7. Если вещество, проникающее через кожу, одновременно является облигатным или аллергическим раздражителем кожи, его резорбтивное действие следует изучать на уровнях концентраций, безвредных при эпикутанном воздействии. Кожно-онкогенное действие вещества изучается по показаниям и независимо от его способности вызывать другие эффекты при эпи- и перкутанном воздействии.

2.8. В целях сопоставимости количественных характеристик действия веществ при пероральном и перкутанном поступлении планирование эксперимента в каждом случае должно предусматривать выявление и формализацию зависимости «доза (концентрация) — эффект» и вероятностную оценку эффективных (в том числе минимально эффективных) и максимальных неэффективных доз и концентраций вещества с пересчетом соответствующих доз при пероральном поступлении на концентрацию в воде.

3. МЕТОДИЧЕСКАЯ СХЕМА ИЗУЧЕНИЯ КОЖНО-РЕЗОРБТИВНОГО ДЕЙСТВИЯ ВЕЩЕСТВ

3.1. Рекомендуемая схема обязательных исследований и этапность их выполнения представлены на рис. 3.1. Условия постановки опытов, регламентируемые впервые настоящими Методическими рекомендациями, излагаются в п. 3.4 и разделах 4 и 5. Схема рассчитана на получение независимой токсикометрической информации, достаточной для объективной оценки кожно-резорбтивного действия веществ в рамках общей программы исследований по экспериментальному обоснованию их ПДК в воде водных объектов.

                                 \/

                                 \/

              \/                                     \/

              \/                                     \/

                                 \/

┌─────────────────────────────────────────────────────────────────────────┐
<pre class="legal-pre">│  Определение лимитирующего признака вредности при сопоставлении МНК по  │
│ кожно-резорбтивному действию, МНД при пероральном введении и пороговых  │
│  концентраций вещества по влиянию на органолептические свойства воды и  │
│                        санитарный режим водоемов                        │</pre>
└─────────────────────────────────────────────────────────────────────────┘

действия химических веществ при поступлении из водной среды

3.2. Ключевое значение имеет установление факта резорбции вещества через кожу. При отрицательном результате дальнейшие исследования не проводятся, при положительном — переходят к количественной оценке кожно-резорбтивного действия вещества.

3.3. Из числа известных методических приемов, используемых для выявления способности вещества всасываться через кожу, предпочтительно проведение опытов на белых крысах, хвосты которых на 2/3 длины погружают в исследуемое вещество (экспозиция 4 часа однократно или повторно в течение 10 — 15 дней), одновременно оценивается местное действие вещества на кожу. Доказательствами кожно-резорбтивного действия являются: гибель животных, клинические проявления интоксикации, сдвиги по наиболее чувствительным (при пероральном введении) тестам, наличие вещества или его метаболитов в крови и тканях. Аналогичные исследования могут быть проведены при погружении животных в водные растворы вещества (см. раздел 4). Отсутствие токсического действия при поступлении вещества через кожу целесообразно подтверждать исследованием соответствующих биохимических и физиологических показателей.

3.4 Количественными характеристиками кожно-резорбтивного действия

веществ  по  общетоксическим  эффектам  являются:  по  летальному  исходу -
среднесмертельная  концентрация (ЛК  ) в остром опыте, среднее время гибели

                               50

животных  (ЕТ  )  и  коэффициент  кумуляции  (К   )  в подострых опытах; по
             50                                кум
специфическим   и   интегральным   тестам   -   максимальные  неэффективные
концентрации  (МНК)  в  остром  и  подостром  опытах  на  белых крысах (при
погружении  в  водные  растворы  веществ). Используют половозрелых животных
массой  150  - 180 г с неповрежденной кожей (в том числе кончиков хвостов).
Соответственно  типичным  реальным условиям купания человека (включая детей
1-го   года   жизни)  перечисленные  критерии  определяют  при  одночасовой

экспозиции и первоначальной температуре воды 37 — 38 °С.

3.5. Количественной характеристикой аллергенных свойств вещества является максимально неэффективная доза (МНД) при внутрикожной сенсибилизации морских свинок (светлой масти), определяемая по тестам, обычно используемым в экспериментальной аллергологии для оценки сенсибилизирующих доз. Внутрикожная сенсибилизация коррелирует с всасыванием веществ через кожу. Оценку разрешающей дозы в ряде случаев можно заменить проверкой рекомендуемой ПДК в аутоэксперименте методом кожных проб.

3.6. Другие токсикологические (вплоть до токсиколого-геронтологических) и специальные (генетические, эмбриологические и т.д.) количественные характеристики кожно-резорбтивного действия веществ в общем случае находят путем экстраполяции экспериментальных данных, полученных при пероральном введении. По усмотрению исследователя, соответствующие данные (полностью или частично) могут быть получены также непосредственно в эксперименте при перкутанном воздействии. Различия в проницаемости кожи животных и человека могут быть рассчитаны на основе «правила массы тела» (Г.Н. Красовский) с учетом соотношений площади поверхности тела к массе (В.Д. Гостинский и Г.Б. Красноневцева).

3.7. Кроме исследований, включенных в схему на рис. 3.1, для обобщенной оценки допустимой концентрации по санитарно-токсикологическому признаку вредности следует учесть характер комплексного действия вещества при поступлении через желудочно-кишечный тракт и через кожу. С этой целью в дополнительном остром опыте на белых крысах определяется коэффициент комплексного действия по Finney в модификации Ю.С. Кагана или методом двух точек.

4. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ КОЖНО-РЕЗОРБТИВНОГО ДЕЙСТВИЯ ВЕЩЕСТВ ПРИ ОДНОКРАТНОМ ВОЗДЕЙСТВИИ

4.1. Купание животных (каждого в отдельности) проводят в обычных стеклянных банках емкостью 1 л, примерно на 3/4 заполненных водой с испытуемыми концентрациями вещества. Животных погружают в воду до шеи. В случае нелетучих веществ банку закрывают пластмассовой крышкой с несколькими небольшими отверстиями для обмена воздуха в подкрышечном пространстве. В случае летучих веществ голову животного предварительно пропускают через крышку с отверстием достаточно большого диаметра, после чего тело животного погружают в воду, одновременно закрывая банку крышкой. Для лучшей фиксации животного и герметизации банки поверх крышки накладывают простое устройство, состоящее из двух пластмассовых полуколец с эластичной прокладкой по внутреннему краю, подгоняя диаметр отверстия к размерам шеи животного. Перед началом исследований целесообразно адаптировать животных к процедуре купания путем погружения в подогретую до 37 — 38 °С водопроводную воду на 1 час ежедневно в течение 3 — 4-х дней.

4.2 Определению ЛК при одночасовой экспозиции в развернутом опыте

                     50

(или  методом  двух  точек)  предшествует  ориентировочный  опыт, в котором
уточняют   подлежащие   испытанию   концентрации   вещества,  учитывая  его
растворимость   в  воде  и  значение  пероральной  ЛД  ,  пересчитанной  на

                                                 50

концентрацию  в  воде аналогично соответствующему пересчету пероральной МНД
(т.е.  умножая  дозу  на  20).  Растворы  готовят  на  водопроводной  воде,
подогретой  до  37  -  38 °С. Каждую порцию приготовленного раствора тотчас

переливают в заранее подготовленную банку, после чего проверяют температуру воды, проделывают процедуру, оговоренную в п. 4.1, и фиксируют момент начала экспозиции (в ходе опыта допускается снижение температуры воды не более чем на 5 °С). Сразу после экспозиции шерсть выживших животных осушают

полотенцем.  Каждую концентрацию вещества в развернутом опыте испытывают не
менее  чем  на 6 животных, при использовании метода двух точек - на 10 - 12
животных.  Наблюдение за животными ведут 2 - 3 недели после экспозиции. При
регламентации    содержания    химических    веществ    в    морской   соде
экспериментальные  исследования следует проводить с использованием нативной
морской  воды или ее имитата с уровнем минерализации 35 г/л при указанном в

таблице макро- и микроэлементном составе.

ПРИ ОБЩЕМ СОЛЕСОДЕРЖАНИИ 35 Г/Л

4.3 Если при максимально достижимой концентрации вещества отмечается

гибель менее 50% животных, экспозицию увеличивают, а одночасовую ЛК 50

оценивают  методом  одной  точки.  Вместо  истинных  растворов  могут  быть
использованы  также мелкодисперсные взвеси веществ в воде (при условии, что
за  время экспозиции оседание частиц практически не происходит). При полном
отсутствии  гибели  животных  в  случае одночасовой экспозиции искомую ЛК

                                                                     50

оценивают методом «экстраполяционного квадрата» (п. 4.9). При значениях ЛК менее 1000 мг/л, от 1000 до 5000 мг/л, от 5000 до 25000 мг/л или более 50 25000 мг/л исследуемые вещества относят соответственно к чрезвычайно токсичным, высоко-, средне- или малотоксичным.

4.4 Поскольку шерстный покров животных может играть определенную

защитную   роль,   в  параллельном  опыте  методом  двух  или  одной  точек
устанавливают  ЛК    для  стриженных  животных.  Шерсть  состригают со всей

             50

поверхности  тела,  кроме  головы,  с помощью электромашинки. Независимо от
полученных результатов  в последующие опыты включают нестриженных животных,
в    необходимых   случаях   внося   в   расчет   испытуемых   концентраций
соответствующую  поправку  на  степень  изменения  перкутанной  токсичности

вещества за счет удаления шерстного покрова животных.

4.5 Значение МНК в общем случае находят по наиболее чувствительным

тестам в момент (t ) наибольшего отклонения от параллельного контроля. max Поэтому предварительно необходимо оценить t при воздействии одной, но max заведомо эффективной концентрации (напр., 1/2 ЛК ), используя технику 50

расчетов  кинетических  констант (В.Н. Соловьев, А.А. Фирсов и В.А. Филов).
Полученные   в   том   же  опыте  сведения  об  убыли  эффекта  во  времени
характеризуют   кумулятивные   свойства   вещества.  В  том  случае,  когда
оказывается,  что  t     <  1  ч,  определение  МНК  проводят  сразу  после

                max

экспозиции.

4.6 Для определения МНК необходимо в один и тот же день (против одного

и  того  же  контроля)  испытать  не  менее трех различных концентраций (C)
вещества,   причем  эффекты  (E)  действия  избранных  концентраций  должны

существенно отличаться друг от друга, а действие меньшей из них — приводить к эффекту, существенно отличающемуся от уровня соответствующего показателя в контроле (Б.М. Штабский, Г.Н. Красовский, В.Н. Кудрина и З.И. Жолдакова).

Для  каждой  испытанной  концентрации  обычным  путем  рассчитывают среднее
значение   эффекта  и  его  доверительный  интервал.  Далее  строят  график
зависимости  E  от  lg C сначала по его средним значениям E, затем по обеим
доверительным  границам  (так,  чтобы  получить  три  параллельные  прямые,
наилучшим  образом  соответствующие экспериментальным точкам). Одновременно
проверяют  линейность  зависимости  E  от lg C, т.е. возможность проведения

идеальной прямой, не выходящей за пределы доверительных интервалов эффектов <*>. Если теперь на оси E отметить интересующую нас степень эффекта (для

МНК   -   уровень   контроля),  то  на  оси  lg  C  можно  найти  логарифмы
соответствующей  концентрации  и ее доверительных границ (сами концентрации

                                                                    0

находят по таблице антилогарифмов). В итоге выражаем МНК в виде CE . 50 Верхняя доверительная граница последней одновременно является нижней min доверительной границей минимально эффективной концентрации (CE ). 50

<*> Если в координатах (E, lg C) линейность отсутствует, переходят к другой подходящей системе координат (напр., E, C).

                                     0                  min
    4.7.  Более  строго  значение  CE  ,  равно  как  CE     и любой другой
                                     50                 50
эффективной  концентрации,  можно  найти путем расчета, используя уравнение

прямой с угловым коэффициентом:

y = a x + b, (4.1)

где:

y = E;

x = lg C;

a — угловой коэффициент;

b — свободный член.

Два последних находят из нормальной системы Гаусса:

                        SUM x SUM y - n SUM x y

                        a = -----------------------;                  (4.2)
                                     2          2
                              (SUM x)  - n SUM x

                                2

               SUM x SUM x y - SUM x  SUM y   SUM y - a SUM x
           b = ---------------------------- = ---------------,        (4.3)
                                      2              n

               (SUM x) n - n SUM x

где n — число испытанных концентраций. При n = 3 справедливо также:

                                   y  - y
                                    2    1
                               a = -------,                           (4.4)
                                   x  - x
                                    2    1

где:

    y  и y  - две крайние степени E;
     1    2
    x  и x  - соответствующие значения lg C.
     1    2

Зная a и b, находят значения x по уравнению (4.1), решая его

относительно  x  при  любом  заданном  значении  y  (для  определения МНК в
качестве   y   подставляем   значение   данного   показателя  в  контроле);
                                                          0             y
x = (y - b) / a.  Для определения  доверительных границ CE    (вообще CE  )
                                                          50            50
дополнительно рассчитывают  два новых значения  свободного члена b' и b" по

значениям доверительных границ E, а затем соответствующие им x' и x».

    4.8.   Если   в   реальном  эксперименте  меньшая  из  трех  испытанных
концентраций    оказывается    неэффективной   (отклонение    от   контроля
несущественно),   она   может   быть   принята   как   приближенная  третья
экспериментальная  точка,  а  в  ряде  случаев используют уравнение прямой,

проходящей через 2 точки:

                            y - y     x - x
                                 1         1
                            ------- = -------.                        (4.5)
                            y  - y    x  - x
                             2    1    2    1

4.9 Если при одночасовой экспозиции удается определить только МНК, а

ЛК установить невозможно (ввиду отсутствия гибели животных), тогда 50

определяют  среднесмертельную  и минимальную неэффективную концентрации при
удлиненной  экспозиции  (ниже - ЛК'  и МНК'), а одночасовую ЛК   находят из
                                  50                          50

условия:

                                ЛК     ЛК'
                                  50     50
                                ---- = ----.                          (4.6)

                            МНК    МНК'

При невозможности установить одночасовую МНК в соответствии с требованиями п. п. 4.6 - 4.8 прибегают к оценке этой МНК методом одной точки.

5. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ КОЖНО-РЕЗОРБТИВНОГО ДЕЙСТВИЯ ВЕЩЕСТВ ПРИ МНОГОКРАТНОМ ВОЗДЕЙСТВИИ

5.1. Техника постановки опытов принимается согласно п. 4.1. Экспозиция во всех случаях — 1 час.

5.2 Для изучения кумулятивных свойств вещества по летальному исходу

проводят  2  серии  опытов.  В  первой  из  них животных (не менее 10 - 12)
подвергают  ежедневному  воздействию  вещества  в  концентрации  1/2  ЛК  .

                                                                    50

Регистрируют время гибели животных и рассчитывают ЕТ в сутках (животных, 50 погибших после первого погружения, не учитывают). При ЕТ < 5 сут.; 5 — 15 50

сут.  и  >  15 сут. степень кумуляции оценивают соответственно как сильную,
среднюю  и  слабую.  Во второй серии опытов животных подвергают воздействию
1/10 ЛК   в течение 30 суток. При гибели хотя бы 50% животных рассчитывают,

   50

как обычно, К по Ю.С. Кагану, различая при этом кумуляцию очень сильную кум

(К     < 1) и сильную (К    = 1 - 3). При гибели менее 50% животных степень
  кум                   кум
кумуляции оценивают как среднюю (К    > 3), а при полном отсутствии  гибели

                              кум

• как слабую (К <= 3). По совокупности результатов обеих серий опыта кум

соответственно   слабой,   средней,   сильной  и  очень  сильной  кумуляции
рассчитывают  ориентировочное значение МНК, равное 1/2000, 1/10000, 1/50000
и  1/250000  ЛК   (аналогично расчету МНД при пероральном введении согласно

           50

«Методическим указаниям» № 1943-78, см. п. 1.1).

5.3 Для оценки МНК в подостром опыте используют методическую схему

Г.Н.  Красовского.  Три  группы животных подвергают ежедневному воздействию
вещества  в  концентрациях, избранных в зависимости от степени выраженности
кумулятивных  свойств  по  летальному исходу (1/5, 1/25, 1/125; 1/10, 1/50,
1/250  ЛК    и  т.д.).  На 5-ые, 10-ые, 20-ые и 30-ые сутки опыта исследуют

     50

зависимость эффекта от концентрации по специфическим и интегральным тестам. Эффекты регистрируют в момент t , установленный при однократном max воздействии по наиболее чувствительному тесту (п. 4.5). Полученные данные анализируют графическим методом (п. 4.6) или согласно п. п. 4.7 - 4.8 с вероятностной оценкой МНК.

5.4 Расчетное значение МНК проверяют в дополнительном опыте, в котором

группу животных подвергают 30-дневному воздействию вещества в концентрации,

близкой  к  расчетной  и составляющей 1/2000, 1/10000, 1/50000 или 1/250000
ЛК    (в  зависимости от степени выраженности кумулятивных свойств вещества

50

по  летальному исходу). Если доверительный интервал эффекта, обусловленного
действием  испытанной  в  этом  опыте концентрации, пересекается с таковым,
соответствующим   той   же  концентрации  по  ранее  найденной  зависимости
"концентрация   -   эффект",   результаты   можно  считать  тождественными.
Окончательное   значение   МНК,  подлежащее  учету  при  совокупной  оценке
допустимой  концентрации  вещества по санитарно-токсикологическому признаку

                                                   0

вредности, принимают по нижней доверительной границе CE . 50

    5.5. От  проведения  подострых  опытов  можно   отказаться,   если:  а)
пороговые концентрации вещества по влиянию  на  органолептические  свойства
воды или санитарный режим водоемов составляют менее 1/250000  ЛК    или  б)

                                                            50

МНД вещества  при  пероральном  введении,  пересчитанная на концентрацию  в
воде, составляет менее 1/250000 ЛК  .

                              50

6. ОЦЕНКА ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ

6.1. Потенциальная опасность смертельного и несмертельного острого отравления, а также хронического отравления, характеризуется коэффициентами возможности отравления при поступлении вещества через кожу:

                        37           37            37
                       C            C             C
                  К  = ----; К  = -------; К  = -------,              (6.1)
                   1   ЛК     2     min     3     min
                         50       CE            CE
                                    50(1)         50(n)

где:
 37

    C   - насыщающая концентрация (мг/л) вещества в воде при 37 °С;
      min       min
    CE      и CE      - нижние доверительные границы минимально эффективных
      50(1)     50(n)
концентраций  (мг/л)  при  однократном  и  многократном воздействии (см. п.

4.6). В зависимости от значений указанных коэффициентов исследуемые

вещества  относят к чрезвычайно опасным (К  > 1),  высокоопасным   (К  = 1;
                                          1                          1
К  > 1),  опасным (К  < 1; К  = 1; К  > 1)  или  умеренно  опасным (К  < 1;
 2                  1       2       3                                2
К  <= 1).

3

6.2 Для сопоставления острой токсичности изучаемого вещества при

пероральном и перкутанном поступлении рассчитывают орально-кожный коэффициент:

                           20 ЛД   (в желудок)
                                50

                        К    = -------------------,                   (6.2)
                         о/к    ЛК   (через кожу)

                              50

принимая во внимание не только средние  величины  ЛД    и  ЛК  ,  но  и  их
                                                    50       50
доверительные границы. Так, при пероральном введении циодрина ЛД   = 60,8 х

                                                            50

(40,5 - 81,0) мг/кг,  что в пересчете  на концентрацию в  воде  составляет:
20 х 60,8 (40,5 - 81,0) = 1216,0 (810,0 - 1660,0)   мг/л;  при  перкутанном
воздействии   циодрина   ЛК   = 1000,0 (890,3 - 1109,7)   мг/л.   Поскольку

                       50

значимых различий между сравниваемыми концентрациями нет, то К = 1. о/к Данный коэффициент может быть использован также для характеристики относительной опасности кожно-резорбтивного действия различных веществ. При

К    > 1  вещество  является  относительно  высокоопасным,  при  К    = 1 -
 о/к                                                              о/к
относительно опасным, при К    < 1 - относительно малоопасным.

                       о/к

6.3. Относительную опасность одного и того же вещества при многократном пероральном и перкутанном поступлении характеризуют сопоставлением изоэффективных и максимальных неэффективных величин.

6.4. Для определения допустимой концентрации (ДК) нормируемого вещества в воде по санитарно-токсикологическому признаку вредности сопоставляют найденные в подострых (хронических, пожизненных) опытах нижние доверительные границы двух концентраций: кожно-резорбтивной МНК и пересчитанной на концентрацию в воде оральной МНД. Учитывают также коэффициент комплексного действия (К), установленный в остром опыте. Значение ДК находят по формуле:

                                        1         1
                      ДК = C  (1 - -----------) х -,                  (6.3)
                            1      1 + C  / C     К
                                        2    1

    где  C   -  меньшая,  C   -  большая  по  абсолютной  величине из обеих
          1                2
сравниваемых  концентраций.  Найденную  ДК  сравнивают  затем  с пороговыми
концентрациями  вещества  по  влиянию  на органолептические свойства воды и

санитарный режим водоемов.

6.5 По смыслу выражения (6.3), когда C / C х К >= 10, то практически

                                           2    1
ДК = C . В подобных случаях, если C  установлена по МНД, кожно-резорбтивным
      1                            1
действием  вещества  можно  пренебречь,  а  лимитирующий  признак вредности
определяется, как  обычно.  Если  же  C  установлена по кожно-резорбтивному

                                   1

действию,    наоборот,   теряет   значение   поступление   вещества   через
желудочно-кишечный  тракт,  и  тогда не исключается, что кожно-резорбтивное
действие  вещества  может  оказаться  лимитирующим  признаком вредности при

рекомендации величины ПДК.

6.6. Нормативы веществ кожно-резорбтивного действия рекомендуются с пометкой «опасно при поступлении через кожу».

ЛИТЕРАТУРА

1. Беруашвили Ц.А. Гигиеническая оценка сероводородных термальных вод, используемых в системе горячего водоснабжения. «Гиг. и сан.», 1980, № 6, с. 11 — 13.

2. Гжегоцкий М.Р. Методические особенности изучения и регламентации в воде водоемов химических веществ кожно-резорбтивного действия (на примере циодрина и полупродуктов его производства). Автореф. дисс. канд. К., 1981.

3. Голубев А.А., Люблина Е.И., Толоконцев Н.А., Филов В.А. Количественная токсикология (избранные главы), Л., «Медицина», 1973.

4. Гостинский В.Д., Краснопевцева Г.Б. Количественные аспекты экстраполяции экспериментальных данных с животных на человека при поступлении химических веществ через кожу. «Гиг. труда и проф. забол.», 1979, № 10, с. 30 — 32.