Методические указания по определению фурадана в растениях, почве и воде методом тонкослойной хроматографии

(утв. Минздравом СССР 30.03.1981 № 2369-81)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ФУРАДАНА В РАСТЕНИЯХ, ПОЧВЕ И ВОДЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

---

<*> Разработаны Л.И. Бублик, Н.В. Федоренко (УкрНИИЗР).

Краткая характеристика препарата. Фурадан — O-(2,3-дигидро-2,2-диметил- 7-бензофуранил)-N-метилкарбамат. Брутто-формула C H O N. Молекулярная 12 15 3 масса 221,26. Общепринятое название — карбофуран. Кристаллическое вещество,

т. пл. 153 - 154 °C, т. пл.  технического препарата 150  - 152 °C. Давление
паров 0,0027 Па при 33 °C и 0,015 Па при 50 °C.  Растворимость  при  25 °C,
г/100 мл:  в воде - 0,7, ацетоне - 15, хлористом  метилене  - 12, этаноле -

4, петролейном эфире — 1. В кислотах и щелочах разлагается при кипячении, в спиртовых растворах щелочей — при комнатной температуре. Для крыс ЛД 50 через рот 8 — 14 мг/кг.

    Продукты  метаболизма фурадана - O-(2,3-дигидро-2,2-диметил-3-гидрокси-
7-бензофуранил)-N-метилкарбамат  (II),   ЛД    18 мг/кг;   2,3-дигидро-2,2-

                                       50

диметил-3-кето-7-бензофуранил-N-метилкарбамат (III), ЛД 69 мг/кг; 50 2,3-дигидро-2,2-диметил-7-бензофуранол (IV), ЛД 2200 мг/кг; 50 2,3-дигидро-2,2-диметил-3,7-бензофурандиол (V), ЛД 1350 мг/кг; 50 2,3-дигидро-2,2-диметил-3-оксо-7-бензофуранол (VI), ЛД 295 мг/кг. 50

Фурадан — акарицид, нематоцид, системный инсектицид. ДСД 0,01 мг/кг. Остаточные количества фурадана в сахарной свекле не допускаются.

Принцип метода. Метод основан на извлечении фурадана и его метаболитов из исследуемой пробы хлороформом или подкисленной водой, очистке путем перераспределения в двух несмешивающихся растворителях и определении методом ТСХ. Проявление основано на гидролизе препаратов спиртовым раствором щелочи и образовании окрашенных соединений с солями диазония.

Метрологическая характеристика метода. Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 96.

Таблица 96

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА

Анализируемая проба	Предел обнаружения, мг/кг или мг/л		Срднее значение определения		Стандартное отклонение, %		Доверительный интервал при p = 0,95, n = 5, %
	а	б	а	б	а	б	а	б
Вода	0,002	0,02	82,5	80,9	+/- 9,3	+/- 6,5	+/- 14,8	+/- 10,3
Почва (чернозем)	0,010	0,10	85,6	82,4	+/- 3,8	+/- 4,9	+/- 6,0	+/- 7,8
Озимая пшеница	0,050	0,30	92,0	91,5	+/- 3,7	+/- 3,4	+/- 5,8	+/- 4,1
(зеленая масса)
Яблоки	0,040	0,08	83,5	84,9	+/- 4,7	+/- 5,8	+/- 7,5	+/- 9,2
Картофель	0,050	0,10	79,0	79,5	+/- 2,8	+/- 4,1	+/- 4,5	+/- 6,5
(клубни)
Сахарная свекла	0,050	0,10	81,8	82,5	+/- 4,9	+/- 5,2	+/- 7,6	+/- 8,3
(корнеплоды)

Примечание. а — на пластинке «Силуфол»; б — на пластинке КСК.

Избирательность метода. Метод специфичен. Севин и другие пестициды не мешают определению.

Реактивы и растворы. Ацетон х.ч. н-Гексан ч. Этиловый спирт ректиф., 96-процентный. Хлороформ х.ч. Хлороводородная кислота, 0,25 н и 0,1 н растворы. Вода дистиллированная. Сульфат натрия безводный ч.д.а. Едкое кали х.ч. п-Нитроанилин ч.д.а. Нитрит натрия х.ч. Соли диазония: прочный синий Б, прочный красный Б, прочный голубой Б (бис-диазотированный о-дианизидин). Фурадан и его метаболиты (II, III, IV, V, VI) — 99%. Силикагель КСК № 2,5. Гипс медицинский. Пластинки «Силуфол» размером 15 x 15 см. Бумага фильтровальная.

Приготовление стандартных растворов: 0,025 г фурадана растворяют в 25 мл ацетона; 10 мл полученного раствора переносят в мерную колбу на 100 мл и ацетоном доводят до метки. Аналогично готовят стандартные растворы метаболитов, содержащих 100 мкг в 1 мл. Хранят растворы в темных склянках с притертыми пробками в холодильнике.

Проявляющие реагенты: 15-процентный KOH в спиртово-водном растворе (15 г KOH растворяют в 60 мл этанола и 40 мл воды); 0,01-процентный раствор соли диазония в ацетоне (0,01 г соли диазония растворяют в 100 мл ацетона).

Хранят в темной  склянке 3 сут.;  0,1-процентный раствор паранитроанилина в
0,1 н хлороводородной  кислоте  (0,1 г паранитроанилина растворяют в 100 мл
0,1 н  раствора   хлороводородной  кислоты);  4-процентный  водный  раствор
нитрита натрия (4 г NaNO  растворяют в 100 мл дистиллированной воды).

                    2

Приборы и посуда. Весы аналитические и технические. Аппарат для встряхивания. Вакуумный насос. Хроматоскоп. Электроплитка. Водяная баня. Колбы мерные на 100 мл; плоскодонные на 250 мл; круглодонные на 250 мл. Мерные цилиндры на 50 и 100 мл. Микропипетки на 0,1 мл. Воронки делительные на 100 и 500 мл. Эксикатор. Камера для хроматографирования. Пульверизаторы стеклянные. Пластинки «Силуфол».

Ход анализа. Экстракция. Пробу воды (200 мл) помещают в делительную воронку. Экстрагируют фурадан и его метаболиты дважды хлороформом порциями по 50 мл, встряхивают каждый раз по 5 мин. Хлороформный экстракт сливают через фильтр с 15 г безводного сульфата натрия в отгоночную колбу. Отгоняют хлороформ на водяной бане при температуре воды в ней 80 °C до объема 0,1 — 0,2 мл.

Навеску 50 г воздушно-сухой почвы растирают в фарфоровой ступке, переносят в коническую колбу и заливают 200 мл дистиллированной воды, подкисленной до pH 3. Встряхивают 20 мин. Экстракт отфильтровывают через бумажный фильтр в делительную воронку. Затем проводят реэкстракцию хлороформом. Далее поступают так, как описано выше.

Пробу образца озимой пшеницы (20 г) измельчают, помещают в коническую колбу и заливают 400 мл дистиллированной воды, подкисленной хлороводородной кислотой до pH 3. Встряхивают 20 мин. Затем экстракт отфильтровывают в делительную воронку. Проводят реэкстракцию фурадана и его метаболитов дважды хлороформом по 100 мл, как описано выше. Экстрагируемые примеси не мешают определению.

Пробу измельченного образца (50 г) яблок, картофеля (клубни), сахарной свеклы (корнеплоды) переносят в коническую колбу и заливают 100 мл хлороформа, экстрагируют при встряхивании 20 мин. Полученный экстракт переносят в колбу через воронку с бумажным фильтром и 15 г безводного сульфата натрия. Отгоняют хлороформ на водяной бане или на ротационном испарителе и остаток сушат досуха (оставляют колбу открытой при комнатной температуре). Сухой остаток растворяют в 100 мл дистиллированной воды, переносят в делительную воронку и проводят реэкстракцию 2 раза по 30 мл хлороформа. Дальнейшие операции проводят, как описано выше.

Хроматографирование. После отгонки хлороформный остаток (0,1 — 0,2 мл) капилляром наносят в центр пластинки с тонким слоем адсорбента на расстоянии 1,5 см от нижнего края. Слева и справа микрошприцем или микропипеткой наносят стандартные растворы фурадана и его метаболитов с содержанием 0,5 — 30 мкг. Одинаковые объемы (0,005 — 0,05 мл) фурадана и его метаболитов наносят в одну точку. Затем пластинку помещают в хроматографическую камеру с подвижной фазой, которой служит смесь н-гексан-ацетон (3:2). Когда растворитель поднимется на высоту 10 см, пластинку вынимают и сушат на воздухе.

    Проявление  пластинок. Пластинки опрыскивают проявляющим реагентом N 1,
подсушивают  и  затем  опрыскивают  проявляющим  реагентом  N  2 или смесью
проявляющих  реагентов  N  3  и  N  4  в  соотношении  10:1.  В  таблице 97
представлены R  на пластинках "Силуфол" и с КСК для I - VI и окраска пятен.

          f

Таблица 97

ВЕЛИЧИНА R И ЦВЕТ ПЯТЕН ОПРЕДЕЛЯЕМЫХ СОЕДИНЕНИЙ f

Соединение	Проявляющий реагент	Цвет пятен	«Силуфол»	КСК
I	Прочный голубой Б	Желтый	0,63	0,70
II	То же	Розовый	0,38	0,40
III	-«-»	Сиреневый	0,49	0,55
IV	-«-»	Желтый	0,78	0,85
V	-«-»	Красный	0,44	0,45
VI I	-«- Прочный синий Б»	Фиолетовый Желтый	0,59 0,63	0,60 0,70
II	То же	Розовый	0,38	0,40
III	-«-»	Сиреневый	0,49	0,55
IV	-«-»	Оранжевый	0,78	0,85
V	-«-»	Кирпично-красный	0,44	0,45
VI I — VI	-«- Прочный красный Б»	Фиолетовый Ярко-малиновый разных оттенков	0,59	0,60
I — VI	n-Нитроанилин	Бордо

Обработка результатов анализа. Содержание фурадана и его метаболитов определяют, сравнивая площади и интенсивность окраски пятен стандартов и проб, или по площади пятен по формуле:

                                 S  - A
                                  2    1
                        A = A  - ------- (S  - S),
                             2   S  - S    2
                                  2    1

где:

A — количество препарата, мкг;

S — площадь пятна определяемого вещества, кв. мм;

    A ,  A ,  S ,  S   -  количества  препарата  и  площади  пятен (кв. мм)
     1    2    1    2

стандартных растворов с явно большим и явно меньшим содержанием вещества по сравнению с анализируемой пробой.

Количество фурадана и его метаболитов в пробе рассчитывают по формуле:

                 A    = A  + A   + A    + A   + A  + A  .
                  мкг    I    II    III    IV    V    VI

Содержание фурадана (X, мг/кг или мг/л) рассчитывают по формуле:

                                  A

X = -, P

где:

P — масса анализируемой пробы, г.

Требования безопасности. Необходимо выполнять все требования безопасности работы с токсичными веществами, кислотами и щелочами.

---