Методические указания по определению видата в растительной продукции, почве и воде методом тонкослойной хроматографии

(утв. Минздравом СССР 30.03.1981 № 2359-81)

30 марта 1981 г. № 2359-81

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ВИДАТА В РАСТИТЕЛЬНОЙ ПРОДУКЦИИ, ПОЧВЕ И ВОДЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

---

<*> Разработаны А.А. Красных (ВНИИЗР).

    Краткая   характеристика  препарата.  Видат  -  (N,N'-диметилкарбамоил)
метилмеркаптоформальдегида   O-(N-метилкарбамоил)   оксим.  Брутто  формула
C H  O N S.  Молекулярная  масса  219,3.  Общепринятое  название - оксамил.

7 13 3 3

Химически  чистое  вещество  видата - белый кристаллический порошок. Хорошо
растворяется  в  этилацетате, ацетоне, дихлорметане. Растворимость в воде -
28%.   Действующее   вещество  препарата  высокотоксично  для  теплокровных
животных.  Выпускается  в  форме  24-процентной  водорастворимой жидкости и
10-процентных  гранул.  ДСД  0,03  мг/кг.  В томатах, огурцах МДУ 0,5 <**>,

сахарной свекле 0,1 <**> мг/кг.

---

<**> Временный норматив.

Принцип метода. Метод основан на извлечении видата из анализируемой пробы этилацетатом, очистке экстракта на колонке с оксидом алюминия, элюировании пестицида со слоя сорбента хлороформом с последующим определением методом ТСХ.

Метрологическая характеристика метода. Минимально детектируемое количество 1 — 3 мкг. Нижний предел определения 0,02 — 0,04 мг/кг. Среднее значение определения, %: в растениях — 85,5, почве — 95,0. Стандартное отклонение в растениях и почве +/- 2,5%. Доверительный интервал среднего при p = 0,95 и n — 5 для растений и почвы +/- 2,5%.

Избирательность метода. Метод специфичен. Другие пестициды в данных условиях хроматографирования определению не мешают.

Реактивы и растворы. Ацетон х.ч. Гексан х.ч. Сульфат кальция ч.д.а. Нитрат серебра х.ч. Хлорид натрия. Оксид алюминия для хроматографии ч., нейтральный, II степень активности по Брокману. Сульфат натрия безводный х.ч. Этилацетат х.ч., свежеперегнанный. Хлорид палладия. Хлороводородная кислота. Силикагель Л/М 5/40 мю. Уксусная кислота х.ч. Изопропиловый спирт. Нингидрин. Бромфеноловый синий ч.д.а. Стандартный раствор видата в этилацетате (10 мг кристаллического препарата растворяют в 100 мл этилацетата).

Проявляющие реагенты: раствор хлорида палладия 0,2 г PdCl помещают в 2

колбу  на  100 мл,  прибавляют  40 - 50 мл 0,01 н  раствора хлороводородной
кислоты.  Колбу  опускают  на  10 - 15 мин.  в водяную баню при 60 - 70 °C.

После полного растворения реактива объем раствора доводят до 100 мл 0,01 н. HCl. После опрыскивания пластинку помещают на 10 — 15 мин. под источник УФ-света. Препарат проявляется в виде желтовато-коричневых пятен на светлом фоне раствор нингидрина. Нингидрин (0,3 г) растворяют в 100 мл изопропанола и добавляют 3 мл ледяной уксусной кислоты. После опрыскивания пластинку нагревают в шкафу 3 — 5 мин. при температуре 170 °C. Пестицид проявляется в виде розовых пятен; смесь бромфенолового синего и нитрата серебра. Готовят два раствора: 0,5-процентный водно-ацетоновый нитрата серебра (1 часть воды

и 3  части  ацетона)  и  0,05 г  бромфенолового  синего растворяют  в 10 мл
ацетона.  Второй  раствор  разбавляют  первым  до  100 мл.  Хранят в темном
прохладном  месте.  После  опрыскивания  проявляющим  реагентом   пластинку
помещают на 15 мин. в сушильный шкаф,  нагретый до 120 °C.  Для  осветления
фона  хроматограмму  после  охлаждения опрыскивают  10-процентным раствором
уксусной кислоты.  Препарат проявляется в виде синих пятен на светло-желтом

фоне.

Посуда и приборы. Аппарат для встряхивания. Ротационный вакуумный испаритель. Воронки делительные на 250 и 500 мл; химические. Сушильный шкаф. Хроматографическая колонка диаметром 15 мм, высотой 250 мм. Хроматографическая камера. Камера для опрыскивания. Опрыскиватель стеклянный. Источник УФ-света ПРК-4. Колбы: конические со шлифом; остродонные: мерные на 100 мл. Микропипетки на 0,1; 0,2 мл. Пластинки хроматографические, 9 x 12 см. Приготовление хроматографических пластинок. Для приготовления сорбционной массы из силикагеля на 10 пластинок размером 9 x 12 см берут 35 г силикагеля, 2 г гипса и 90 мл дистиллированной воды. Силикагель с гипсом растирают в фарфоровой ступке, прибавляют воду и размешивают до образования однородной массы. Суспензию 10 г наносят на пластинку и равномерно распределяют по поверхности. Пластинки сушат в горизонтальном положении в течение 18 — 20 ч при комнатной температуре.

Ход анализа. Экстракция. Пробу воды 200 мл помещают в делительную воронку, прибавляют 10 — 15 г хлорида натрия и экстрагируют тремя порциями этилацетата в течение 5 мин. порциями по 80, 60 и 50 мл. Объединенный экстракт сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют на ротационном испарителе до небольшого объема (0,2 — 0,3 мл) при температуре воды не выше 60 °C. Следы растворителя удаляют в токе воздуха.

Навеску (25 г) растительного материала (трава, овощи, зерно) или измельченной почвы (100 г) помещают в коническую колбу, приливают 80 мл этилацетата. Экстракцию проводят путем встряхивания в течение 15 мин. Растворитель отфильтровывают через складчатый фильтр со слоем безводного сульфата натрия. Экстракцию препарата повторяют еще дважды. Объединенный экстракт концентрируют на ротационном испарителе до объема 0,2 — 0,3 мл. Остаток растворителя удаляют в токе воздуха.

Очистка экстракта. Сухой остаток из почвы и овощей растворяют в 2 мл хлороформа и переносят на хроматографическую колонку, заполненную на высоте 2 см окисью алюминия. Видат элюируют 30 мл хлороформа. Элюат отгоняют на ротационном испарителе. Остаток из муки и травы растворяют в 40 мл воды, фильтруют в делительную воронку. В воронку приливают 50 мл н-гексана и встряхивают в течение 3 мин. После разделения гексановый слой отбрасывают. Очистку гексаном повторяют еще раз. Из водного раствора пестицид экстрагируют этилацетатом трижды по 75 мл в течение 3 мин. Объединенный экстракт сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют на ротационном испарителе до объема 0,2 — 0,3 мл. Следы растворителя удаляют в токе воздуха.

    Хроматографирование.   Сухой  остаток  растворяют  в  небольшом  объеме
этилацетата  (0,2 - 0,3 мл) и наносят на расстоянии 2 см от нижнего края на
хроматографическую  пластинку  со  слоем  силикагеля  или "Силуфол". Стенки

колбы тщательно смывают несколькими каплями растворителя, который наносят в

центр  пятна.  Справа  наносят  стандартные  растворы  препарата. Пластинку
сначала  хроматографируют  в хлороформе, затем после подсушивания в системе
подвижных растворителей  гексан-изопропиловый  спирт (1:3).  После того как
фронт  подвижного  растворителя  поднимается на высоту 10 см, хроматограмму
вынимают   из  камеры,  подсушивают  на  воздухе  и  опрыскивают  одним  из
проявляющих реагентов. Величина R  препарата 0,45 - 0,50.

                             f

Обработка результатов анализа. Количественное определение проводят путем сравнения площади пятна пробы с наиболее близкой к ней по величине площадью стандарта. Содержание препарата в анализируемой пробе (X, мг/кг или мл/л) рассчитывают по формуле:

                                  A

X = -, P

где:

A — количество препарата, найденное путем сравнения размера и интенсивности окраски пятен пробы и стандартного раствора, мкг;

P — масса или объем пробы, взятый для анализа, г или мл.

---