Методические указания по определению ЭФ-2 в воде и почве газожидкостной хроматографией
(утв. Минздравом СССР 28.01.1980 № 2147-80)
Примечание
Документ включен в Перечень нормативной документации, разрешенной для использования в государственных ветеринарных лабораториях при диагностике болезней животных, рыб, пчел, а также контроля безопасности сырья животного и растительного происхождения (утв. Россельхознадзором 30.07.2009 № 02-03-48/563).
Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А. И. Заиченко
28 января 1980 г. № 2147-80
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ЭФ-2 В ВОДЕ И ПОЧВЕ
ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР.
Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Е.И. Марциновского и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.
1. Краткая характеристика препарата
ЭФ-2 — протравитель семян. Действующее начало препарата — 2-дихлор-метилен-3а-7а-дихлор-3а,4,7,7а-тетрагидро-4,7-метаноиндан-1,3-дион.
H
| H H | / / H \ \ | \ \ H / / / | Cl O __// \ = CCl C H Cl O . __/ 2 11 6 4 2 Cl \ Мол. масса 344,0. O |
|---|
H
ЭФ-2 в чистом виде - белые кристаллы с Т пл. 129 - 131 °С. Нерастворим в воде. Растворимость при 20 °С в гептане 4,99, этаноле 5,96, четыреххлористом углероде 168,7, ацетоне 185,7 мг/л, хорошо растворим в
-4
бензоле, толуоле, гексане. Упругость паров 3,088 х 10 мм рт. ст. при -3 20 °С и 1,925 х 10 мм рт. ст. при 40 °С. ЛД для теплокровных 475 мг/кг. 50 ПДК в воде 0,01 мг/л, в почве еще не установлена.
2. Методика определения ЭФ-2 в почве и воде газожидкостной хроматографией
2.1. Основные положения
2.1.1 Принцип метода
Метод основан на извлечении фунгицида из воды гексаном, из почвы смесью ацетон — бензол (1:1) и газохроматографическом определении с использованием детектора по захвату электронов. Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.
Диапазон определяемых концентраций в воде 0,002 мг/л + 0,04 мг/л
Предел обнаружения в мкг - 0,0002 Предел обнаружения в воде - 0,002 мг/л
Средние значения определения стандартных количеств, стандартные и средние стандартные отклонения для трех уровней концентраций представлены в таблице:
| Концентрация ЭФ-2, мг/л (для воды), мг/кг (для почвы) | Среднее значение определения стандартных количеств С, % | Число параллельных определений, n | Стандартное отклонение, ср. | Относительное стандартное отклонение, отн., % | Доверительный интервал среднего при р = 0,95 и n = 5, % |
|---|---|---|---|---|---|
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
| Вода | |||||
| 0,004 | 97,5 | 5 | 3,2 | 4,0 | 97,5 +/- 3,9 |
| 0,01 | 98,0 | 4 | 2,1 | 3,4 | 98,0 +/- 3,4 |
| 0,02 | 100,0 | 4 | 2,5 | 3,9 | 100,0 +/- 3,9 |
| Почва | |||||
| 0,1 | 95,0 | 4 | 1,05 | 1,8 | 95,0 +/- 1,8 |
| 0,5 | 96,0 | 6 | 2,3 | 2,5 | 96,0 +/- 2,5 |
| 1,0 | 97,0 | 4 | 2,4 | 4,0 | 97,0 +/- 3,8 |
2.1.2 Избирательность метода
Метод селективен; ДДТ, его метаболиты и линдан определению не мешают.
2.2. Реактивы и материалы
Бензол, ГОСТ 5955-75, хч, свежеперегнанный.
Ацетон, ГОСТ 2603-71, чда, свежеперегнанный.
Гексан, ТУ 6-09-3375-73, перегнанный.
Натрий сернокислый безводный, ГОСТ 4166-76, хч.
Хроматон N-AW-ДMCS (фр. 0,20 — 0,25 мм) с 5% метилсиликона SE-30.
Азот особой чистоты газообразный, ГОСТ 9293-74.
Стандартный раствор ЭФ-2 в толуоле с концентрацией 1 мг/мл готовят растворением 0,0100 г ЭФ-2 в 10 мл растворителя.
Стандартные растворы ЭФ-2 в толуоле стабильны при хранении в холодильнике в течение 1 года.
2.3. Приборы, аппаратура и посуда
Хроматограф «Газохром-1106» с детектором по захвату электронов или аналогичный прибор.
Вакуумный ротационный испаритель.
Хроматографическая колонка стеклянная длиной 150 см и внутренним диаметром 3 +/- 0,5 мм, заполненная хроматоном N-AW-ДMCS (0,20 — 0,25 мм) с 5% SE-30.
Воронка делительная ГОСТ 10054-75, на 1000 мл.
Колбы грушевидные с пришлифованной пробкой, ГОСТ 10394-72, емкость 100 мл.
Колбы от воронки Бюхнера, емкость 1000 и 250 мл.
Воронка, ГОСТ 8613-73, d 80 мм.
Колбы конические плоскодонные, ГОСТ 10394-72, емкость 250 мл.
Вакуум-насос (водоструйный, масляный).
2.4. Подготовка проб к анализу
Вода. Воду фильтруют от механических примесей и отбирают среднюю пробу (500 мл).
Почва. Из воздушно-сухого смешанного почвенного образца весом 1 кг методом квартования отбирается средняя проба. Средняя проба растирается в ступке и просеивается через сито 0,5 мм. Из просеянной пробы берется для анализа навеска 20 г.
2.5. Проведение определения
Вода [1]. Пробу воды (500 мл) помещают в делительную воронку и экстрагируют двумя порциями гексана по 30 мл. Объединенный экстракт сушат безводным сульфатом натрия и фильтруют в грушевидную колбу емкостью 100 мл. С помощью ротационного вакуумного испарителя полностью отгоняют растворитель. К сухому остатку пипеткой добавляют 10 мл ацетона. Колбу закрывают пробкой на шлифе и тщательно смывают стенки колбы растворителем. В хроматограф вводят 1 мкл полученного раствора.
Почва [1]. К 20 г средней пробы почвы добавляют 10 мл воды, помещают в коническую колбу с притертой пробкой и экстрагируют дважды смесью растворителей (20 мл бензола и 20 мл ацетона) при встряхивании в течение 30 мин. Почву отфильтровывают под вакуумом и объединенный экстракт переносят в колбу для отгонки, и растворители отгоняют досуха сначала на ротационном испарителе, затем в токе воздуха. К сухому остатку пипеткой добавляют 10 мл ацетона. Колбу закрывают пришлифованной пробкой и тщательно смывают стенки колбы растворителем. В хроматограф вводят 2 мкл полученного раствора.
Условия хроматографирования [2]
Хроматограф с детектором по захвату электронов; -11
Рабочая шкала электрометра 10 А;
Скорость протяжки картограммы самописца 600 мм/час;
Колонка стеклянная спиральная длиной 1,5 м и внутренним диаметром 3 +/- 0,5 мм, заполненная хроматоном N-AW-ДМСS (0,2 — 0,25 мм) с 5% SE-30;
Температура термостата испарителя 250 °С, колонки 200 °С, детектора 230 °С;
Расход газа-носителя (азот особой чистоты) в мл/мин. через колонку 40 +/- 2; через продувочную камеру детектора 60 +/- 2;
Линейность детектирования от 0,02 — 4 нг;
Объем, вводимый в испаритель, 2 мкл;
Минимально детектируемое количество 0,2 нг;
Абсолютное время удерживания ЭФ-2 1 мин. 55 сек. +/- 5 сек.;
Время удерживания хлорорганических пестицидов в этих условиях:
Хроматографирование проводят дважды. На хроматограммах измеряют высоты пиков, соответствующих ЭФ-2, вычисляют среднее значение из двух параллельных определений. Количественное определение проводят по методу абсолютной калибровки. Для построения градуировочного графика готовят 10 искусственных смесей. Для этого в пробирки помещают 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20, 25 и 30 мкл стандартного раствора ЭФ-2. К указанным количествам стандартного раствора приливают по 10 мл толуола и по 2 мкл полученных растворов, содержащих соответственно 0,2; 0,4; 0,6; 0,8; 1; 2; 3; 4; 5 и 6 нг ЭФ-2, хроматографируют при указанных выше условиях. На хроматограммах измеряют высоты пиков ЭФ-2 и строят график зависимости этих высот в мм от количества ЭФ-2 в нг.
Альтернативные условия хроматографирования [2]
Колонка длиной 1 м, внутренним диаметром 3 мм заполнена хроматоном N-AW-HMDS (0,125 — 0,160 мм) с 3,5% DOW-200 + 1,5% QF-1.
Т. колонки 190 °С, Т. испарителя 200 °С, Т. детектора 220 °С. В этих условиях времена удерживания:
альфа-ГХЦГ - 1 мин. 3 с линдана - 1 мин. 10 с ЭФ-2 - 2 мин. гептахлора - 2 мин. 45 с пп'ДДЕ - 5 мин. 3 с пп'ДДД - 6 мин. 43 с пп'ДДТ - 8 мин. 38 с.
2.6. Обработка результатов анализа
Содержание ЭФ-2 в пробе в мг/кг или мг/л вычисляют по формуле:
A х V
X = ----------, мг/кг (мг/л), V х P х R a
где:
A — количество ЭФ-2, найденное в аликвоте по градуировочному графику, в нг;
V — объем вводимой в хроматограф аликвоты в мкл (2 мкл); a
V — общий объем пробы в мл (10 мл);
P — навеска анализируемой пробы в г или объем воды в мл;
R — пересчетный коэффициент, учитывающий сорбцию ЭФ-2 почвы во времени. Определяют предварительно для разного типа почв.
3. Требования безопасности
При работе соблюдать правила безопасности, принятые для работы с легколетучими жидкостями, а также требования техники безопасности, регламентируемые инструкцией по эксплуатации приборов с источниками радиоактивного излучения.
4. Литература
1. К.Ф. Новикова, Л.И. Лещинская.
«Определение остаточных количеств ЭФ-2 в зерне и воде методом газожидкостной хроматографии с использованием детектора по захвату электронов».
Химия в с.х. № 4, 61 — 63, 1975 г.
5. Авторы
Настоящие Методические указания включают разработку авторских коллективов:
1. И.И. Пиленкова, Р.Г. Юркова.
Уфимский филиал ВНИИ химических средств защиты растений, г. Уфа.
2. К.Ф. Новикова, Л.И. Лещинская.
6. Дополнения
Настоящие Методические указания рекомендованы в добавление к «Определению остаточных количеств ЭФ-2 в зерне методом газожидкостной хроматографии с детектором по захвату электронов», разработанному Новиковой К.Ф., Лещинской Л.И., утвержденному МЗ СССР 22 сентября 1975 г., № 1350-75, опубликованному в МУ, часть VII, стр. 24 — 28, 1976 г.