Методические указания по определению трифорина в воде

(утв. Минздравом СССР 28.01.1980 № 2140-80)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТРИФОРИНА В ВОДЕ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Е.И. Марциновского и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

1. Характеристика анализируемого пестицида

Активное вещество — 1 1 1 1 1 1,4-бис-(1 -формамидо-2 ,2 ,2 -трихлорэтил-1 )-пиперазин.

    Структурная формула:                           Эмпирическая формула:

    Cl C-CH-NH-CHO                                 C  H  Cl N O

3	10 14 6 4 2

     N
    / \

    \ /
     N

Cl C-CH-NH-CHO
  3

Торговое наименование saprol, фунгинекс, трифорин 20.

Молекулярная масса трифорина 434,96.

Трифорин — белое кристаллическое вещество без запаха. Темп. пл. 156 — 158 °С (с разложением). Растворимость при комнатной температуре в воде 27 — 29 мг/л.

    Хорошо    растворяется    в    диметилформамиде,    диметилсульфоксиде,
тетрагидрофуране.  Растворяется  в  ацетоне,  бензоле, хлороформе. Давление

          -7

пара  2  х  10    мм  рт.  ст.  при 20 °С. Выпускается в виде эмульсионного
концентрата  трифорина.  Токсичность  ЛД    для  крыс  и  мышей 6000 мг/кг.

                                    50

Трифорин  обладает  защитным,  куративным, до некоторой степени системным и
акарицидным  действием. Препарат предназначен для борьбы с мучнистой росой,
паршей,  ржавчиной,  монилиозами  и  болезнями  листьев злаковых, плодовых,
овощных  и  декоративных  культур.  Можно  применять  на  яблоне  (парша  и
мучнистая  роса),  на  винограде  (сидиум  и  серная  гниль)  и  на огурцах

(мучнистая роса).

методом тонкослойной хроматографии

2.1 Основные положения

2.1.1 Принцип метода

Метод основан на экстракции пестицида из анализируемой пробы хлороформом, очистке экстракта и хроматографировании на пластинках «Силуфол» или в тонком слое силикагеля.

Подвижными фазами служат смеси: н-гексан и ацетон (10:7) или н-гептан и ацетон (1:2).

Проявление хроматограмм осуществляется двумя способами.

I способ. Раствором азотнокислого серебра и аммиака в ацетоне с последующим ультрафиолетовым облучением.

II способ. 5-процентным раствором фосфорномолибденовой кислоты с последующим 5-минутным нагревом при 80 — 90 °С и ультрафиолетовым облучением.

2.1.2 Метрологическая характеристика метода

Диапазон определяемых концентраций — 0,1 — 10 мкг.

Нижний предел обнаружения трифорина (см. таблицу):

	«Силуфол»		Силикагель
	Проявляющий реактив		Проявляющий реактив
	AgNO 3	Фосфорномолибденовая кислота	AgNO 3	Фосфорномолибденовая кислота
Из стандартного раствора, трифорин, мкг Нижний предел обнаружения трифорина в воде, мкг, в анализируемом объеме воды	0,1 0,4	2 — 3 3 — 4	0,2 0,5	3 5 — 6

Размах варьирования R = 95 — 80 = 15%.

Среднее значение определения стандартных количеств пестицидов — 88%.

Стандартное отклонение — 2,5%.

Относительное стандартное отклонение — 0,03.

Доверительный интервал среднего при р = 0,95 и n = 5 альфа = 88 +/- 3%.

Определению не мешают пестициды кельтан, хлорофос, оксихлорид меди, которые применяются для обработки тех же культур.

2.2 Реактивы и растворы

Азотнокислое серебро.

Аммиак, 25-процентный.

Ацетон, х.ч.

н-Гексан, х.ч.

н-Гептан, х.ч.

Натрий сернокислый безводный.

Пластинки «Силуфол».

Силикагель Л, ЛСД 5/40 мю. 254

Смесь растворителей № 1. Н-гексан и ацетон = 10:7.

Смесь растворителей № 2. Н-гептан и ацетон = 1:2.

Спирт этиловый.

Стандартный раствор трифорина. Растворяют 0,025 г препарата (х.ч.) в 50 мл этилового спирта. Концентрация препарата 500 мкг/мл.

Фосфорномолибденовая кислота, 5-процентный раствор в этиловом спирте.

Хлороформ, х.ч.

2.3 Посуда и приборы

Воронки химические.

Камера для опрыскивания пластин.

Камера для хроматографирования.

Колбы конические 100, 150 мл.

Грушевидные колбы для отгонки растворителя.

Лампа ультрафиолетовая марки ОКН-11.

Капилляры для нанесения проб.

Микрошприцы на 1 и 10 микролитров.

Пластинки стеклянные размером 90 х 120 мм со слоем силикагеля (используются в случае отсутствия пластинок «Силуфол»).

Прибор для отгонки растворителя.

Пульверизатор стеклянный.

Шкаф сушильный.

Цилиндры мерные на 50, 100 мл.

2.4 Подготовка к определению. Приготовление пластинок

Стеклянные пластинки размером 90 х 120 мл тщательно моют раствором хромовой смеси, промывают проточной водой, затем дистиллированной и сушат.

Взвешивают 14 г силикагеля и 1 г гипса. В фарфоровой ступке растирают с

40  мл  дистиллированной  воды.  Наносят на пластинки одинаковое количество
массы  и оставляют сохнуть до следующего дня на воздухе. Хранят пластинки в
эксикаторе  над  CaCl .  Активирование  пластинки  проводят  нагреванием  в

                 2

сушильном шкафу при 130 — 140 °С в течение 30 мин. непосредственно перед их использованием.

2.5 Проведение определения

2.5.1 Экстракция

К 100 мл анализируемой воды в делительной воронке прибавляют 50 мл хлороформа и встряхивают 5 мин. Экстракцию хлороформом повторяют. Хлороформный слой два раза профильтровывают через воронку, заполненную 4 — 5 г безводного сернокислого натрия. Фильтрат упаривают до 0,1 мл.

2.5.2 Хроматографирование

Экстракт с помощью капилляра наносят на пластинку для хроматографирования. Колбу промывают 0,1 мл хлороформа 4 — 5 раз и наносят на пластинку. Рядом с пробой наносят стандартный раствор микрошприцем в количестве 0,1 — 10 мкг.

Пластинку опускают в камеру для хроматографирования. Когда растворитель

(н-гексан  и  ацетон = 10:7 или н-гептан и ацетон = 1:2) поднимется на 10 -
11  см,  пластинку вынимают и выдерживают при комнатной температуре 30 - 45
мин.,  чтобы  полностью  улетучился  растворитель,  и проявляют. Проявляя с
азотнокислым   серебром,   пластинку   после  опрыскивания  высушивают  при
комнатной  температуре  и  облучают  ультрафиолетовым  светом  5  -  7 мин.
Проявляя  с  фосфорномолибденовой  кислотой,  пластинки  после опрыскивания
высушивают  при комнатной температуре, выдерживают в сушильном шкафу 5 мин.
при  80  -  90 °С и облучают ультрафиолетовым светом 5 - 7 мин. При наличии
трифорина  в  анализируемой  пробе  воды  появляется пятно черного цвета на
светлом   фоне   (азотнокислое  серебро)  и  желтое  пятно  на  синем  фоне
(фосфорномолибденовая   кислота).   Величины  R   в  системе  растворителей

                                           f

н-гексан  и  ацетон  = 10:7 - 0,38 - 0,39, н-гептан и ацетон = 1:2 - 0,70 -
0,72.  Сравнивают  размер  и интенсивность пятен проб с пятном стандартного

раствора.

2.6 Обработка результатов анализа

Количественное определение производится путем сравнения площади пятен проб и стандартных растворов. Измерение площадей осуществляется с помощью стекла, на котором нанесена миллиметровочная сетка. Пропорциональная зависимость между площадью пятна и концентрацией препарата наблюдается до 10 мкг. При больших содержаниях препарата на пластинку наносят часть экстракта.

Содержание препарата в анализируемой пробе в мг/л (Х) рассчитывается по формуле:

                                А х S
                                     2

Х = ------, Р х S 1

где:

А — количество стандартного раствора, мкг;

S — площадь пятна стандартного раствора, кв. мм; 1

S — площадь пятна пробы, кв. мм; 2

Р — количество пробы, взятой для анализа, мл.

2.7 Требования безопасности

Соблюдать требования безопасности, обычно рекомендуемые для работы с органическими растворителями, УФ-светом.

2.8. Методические указания подготовлены НИИ эпидемиологии, микробиологии и гигиены Минздрава Лит. ССР (к.х.н. Юргайтене П.Ю.) и ВНИИ гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пластических масс (д.б.н., проф. Клисенко М.А., к.х.н. Киселевой Н.И.).

---