Методические указания по определению дуала в растительном материале, почве и воде хроматографией в тонком слое

(утв. Минздравом СССР 28.01.1980 № 2139-80)

санитарного врача СССР А. И. Заиченко 28 января 1980 г. № 2139-80

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Е.И. Марциновского и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

1. Краткая характеристика препарата

1.1 Дуал

1.2. 2-этил-6-метил-N-(N'-метил-2-метоксиэтил)-хлорацетанилид

1.3 Структурная формула:

           CH
       CH  | 3

  ─── /  3 CH-CH -OCH

//   \\   /     2    3

    \ ___ /──N
      ───     \

          \    COCH Cl
           C H     2
            2 5                                           Мол. масса 283,8.

1.4 СГА-24705

1.5. Химически чистое вещество дуала представляет собой бесцветную жидкость с точкой кипения 100 °С, хорошо растворяется в большинстве органических растворителей (хлороформ, гексан и др.). Слабо растворяется в воде 5 мг/л при 20 °С.

Разрушается в сильно кислотных и щелочных средах. Препарат малотоксичен для теплокровных животных. ЛД при оральном введении для крыс составляет 50 3170 мг/кг.

Выпускается в форме эмульгирующихся концентратов.

2. Методика определения дуала

2.1 Основные положения

2.1.1 Принцип метода

Метод основан на извлечении дуала из растительных проб, почвы и воды органическим растворителем (хлороформ, бензол), очистке экстрактов путем осаждения коэкстрактивных веществ и способом перераспределения между двумя несмешивающимися жидкостями.

Количественное определение проводят хроматографическим в тонком слое методом.

2.1.2 Метрологическая характеристика метода

Минимально детектируемое количество 2 — 3 мкг, нижний предел определения 0,02 — 0,04 мг/кг.

Р — размах варьирования, %

в растениях 86,0 — 91,5

в почве 92,5 — 97,5

дельта — среднее значение определения, %

в растениях 85,5

в почве 95 95,0

S — стандартное отклонение, %

в растениях 2,5

в почве 2,5

Доверительный интервал среднего при Р = 0,95 и n = 5%

для растений 85,5 +/- 2,5

для почвы 95,6 +/- 2,5.

2.1.3 Избирательность метода

Метод специфичен, другие ацетанилидные препараты в данных условиях хроматографирования определению не мешают.

2.2 Реактивы и растворы

Хлороформ, х.ч., ГОСТ 3160-51, CHCl . 3

н-Гексан, х.ч., МРТУ 6-09-2937-66, CH (CH ) CH . 3 2 4 3

Ацетон, х.ч., ГОСТ 2603-63, CH COCH . 3 3

Бензол, ч.д.а., ГОСТ 5955-68, C H . 6 6

Натрий сернокислый безводный, ч.д.а., ГОСТ 4166-66, Na SO . 2 4

Аммоний хлористый, х.ч., ГОСТ 3773-60, NH Cl. 4

Кислота ортофосфорная, ч., ГОСТ 6552-58, H PO . 3 4

Силикагель ЛМ 5/40, ЧССР, или КСК.

Аммиак, о.с.ч., МРТУ 6-09-3266-66, NH OH. 4

    Кальций сернокислый, ч.д.а., ГОСТ 3210, CaSO  х 2H O.
                                                4     2

Серебро азотнокислое, х.ч., ГОСТ 1277-63, AgNO . 3

Коагулирующий раствор: 5 г хлористого аммония растворяют в 10 мл дистиллированной воды, приливают 10 мл 85-процентной ортофосфорной кислоты и доливают до литра дистиллированной водой.

Проявляющий реактив: 0,5 г азотнокислого серебра растворяют в 5 мл дистиллированной воды, прибавляют 7 мл аммиака и доводят до 100 мл ацетоном.

Стандартный раствор дуала в хлороформе с содержанием по д.н. 100 мкг/мл.

2.3 Приборы и посуда

Колбы конические на шлифах КШ-500 29/32 ТС, ГОСТ 10394-72.

Колбы грушевидные ОКТ-14/23 ТС, ГОСТ 10394-72.

Делительные воронки ВД-3-500, ГОСТ 8613-75.

Воронки.

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, 100 мл.

Аппарат для встряхивания АВУ-1, ТУ 64-1-1081-73.

Ротационный вакуумный испаритель ИР-IМ, ТУ 25-11-917-74.

Хроматографическая камера.

Микропипетки (0,1 — 0,2 мл).

Камера для опрыскивания.

Опрыскиватель.

2.4 Подготовка к определению

2.4.1 Приготовление пластинок

Для приготовления сорбционной массы из силикагеля на 10 пластинок размером 9 х 12 см берут 35 г силикагеля, 2 г гипса и 90 мл дистиллированной воды. Силикагель с гипсом растирают в фарфоровой ступке, прибавляют воду и размешивают до образования однородной массы. 10 г суспензии наносят на пластинку и равномерно распределяют по поверхности.

Сушат пластинки в горизонтальном положении в течение 18 — 20 часов при комнатной температуре, хранят в эксикаторе.

2.5 Ход анализа

2.5.1 Отбор и подготовка проб

Растительную пробу измельчают ножом на кусочки 0,5 х 0,5 х 0,5 см, зерно размалывают и отбирают среднюю пробу 40 г.

Почву в естественно-влажном состоянии или воздушно-сухую просеивают через почвенное сито и для анализа отбирают 100 г.

Проба воды — 200 мл.

2.5.2 Экстракция

Анализируемые навески помещают в конические колбы емкостью 250 мл; пробы воды — в делительные воронки, куда добавляют по 10 мл хлористого натрия. Из растений и почвы дуал экстрагируют 80 мл хлороформа или бензола путем встряхивания в течение 1,5 часа. Экстракты отфильтровывают через бумажный фильтр со слоем безводного сернокислого натрия, колбу и фильтр трижды промывают тем же растворителем по 20 мл. Из воды препарат экстрагируют хлороформом трижды по 10 минут порциями по 60, 50 и 40 мл. Объединенный экстракт сушат безводным сернокислым натрием.

Экстракты концентрируют под вакуумом до 0,5 — 1,0 мл при температуре воды 40 °С. Остаток растворителя удаляют в токе воздуха.

2.5.3 Очистка экстракта

Сухой остаток растворяют в 3 — 4 мл охлажденного ацетона и прибавляют 25 — 30 мл охлажденной коагулирующей смеси. Колбу на 40 минут помещают в холодильник. Водно-ацетоновую смесь после охлаждения фильтруют через плотный бумажный фильтр. Дуал экстрагируют в делительной воронке н-гексаном трижды в течение 5 минут порциями по 40 мл.

Объединенный экстракт концентрируют под вакуумом до 0,5 — 1,0 мл. Остаток растворителя удаляют в токе воздуха.

2.5.4 Хроматографирование

Сухой остаток растворяют в небольшом объеме хлороформа (0,2 — 0,3 мл) и наносят на расстоянии 2 см от нижнего края хроматографической пластинки со слоем силикагеля. Стенки колбы тщательно смывают несколькими порциями растворителя, который наносят в центр пятна. Справа наносят стандартные растворы дуала.

Для дополнительной очистки используют двумерную хроматографию. В качестве первой подвижной фазы применяют четыреххлористый углерод. Затем хроматографируют в системе подвижных растворителей диэтиловый спирт, четыреххлористый углерод в соотношении 2:3, повернув пластину на К 90° по направлению движения первой подвижной фазы. После того как фронт подвижного растворителя поднимется на высоту 10 см, хроматограмму вынимают из камеры, подсушивают на воздухе и помещают на 5 минут под источник УФ-света, после чего ее опрыскивают проявляющим реактивом и снова облучают УФ-светом до четкого проявления темно-серых пятен дуала.

R дуала в данных условиях хроматографирования составляет 0,65 — 0,67. f

2.6 Обработка результатов анализа

Количественное определение производится путем сравнения интенсивности окраски и площади пятен проб и стандартных растворов.

Содержание препарата в анализируемой пробе, мг/л, мг/кг, рассчитывают по формуле:

                                А х S
                                     2

Х = ------, Р х S 1

где:

А — количество мкг стандартного раствора препарата;

S — площадь пятна стандартного раствора, кв. мм; 1

S — площадь пятна пробы, кв. мм; 2

Р — вес или объем пробы, взятой на анализ, г, мл.

2.7 Требования безопасности

Соблюдать требования безопасности, обычно рекомендуемые для работы с органическими растворителями, УФ-светом.

2.8. Настоящие Методические указания разработаны кандидатом с.-х. наук А.А. Красных, Всероссийский НИИ защиты растений, пос. Рамонь Воронежской обл.