Методические указания по определению нитрохлора и префорана в эфирных маслах и эфиромасличном сырье методом газожидкостной хроматографии

(утв. Минздравом СССР 28.01.1980 № 2125-80)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ НИТРОХЛОРА И ПРЕФОРАНА В ЭФИРНЫХ МАСЛАХ И ЭФИРОМАСЛИЧНОМ СЫРЬЕ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Е.И. Марциновского и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

1. Характеристика анализируемых гербицидов

Нитрохлор — отечественный гербицид, рекомендованный для борьбы с сорняками на шалфее мускатном.

Химическое название: 2',4'-дихлорфенил-4-нитрофениловый эфир.

Структурная формула:

        ___ Cl    ___

    Cl/     \-O-/     \NO                                 Мол. масса 284,1.
      \\   //   \\   //  3                                C  H Cl NO .
        ───       ───                                      12 7  2  3

    Эмпирическая формула: C  H O Cl N.
                           12 7 3  2
    Физико-химические  свойства:  светло-желтое  кристаллическое  вещество,
температура плавления 70 - 71°.  Растворимость в воде при 25 °C - 0,8 мг/л.
Хорошо  растворим  в ацетоне, бензоле, диоксане, четыреххлористом углероде,
хуже в спиртах. ЛД   для крыс - 3050 мг/кг.

              50

Концентрат эмульсии с содержанием д.в. нитрохлора 25% используется при внесении по вегетирующим растениям.

Префоран — гербицид фирмы Сиба-Гейги, рекомендованный для борьбы с сорняками на шалфее мускатном.

Химическое название: 2,4'-динитро-4-трифторметил-дифениловый эфир.

Структурная формула:

        NO

         ___  2    ___

    F C/     \-O-/     \NO                               Мол. масса 328,21.
     3 \\   //   \\   //  2


    Эмпирическая формула: C  H O N F .

                       13 7 5 2 3

    Физико-химические  свойства:  светло-желтое  кристаллическое  вещество,
температура плавления  91,6  -  92,2 °C. Трудно растворяется в воде, хорошо
растворим  в  ацетоне, бензоле, ксилоле, диметилформамиде, спирте. ЛД   для

                                                                 50

крыс — 10000 мг/кг.

Концентрат эмульсии с содержанием д.в. префорана 30% используется при внесении по вегетирующим растениям.

2. Методика определения нитрохлора и префорана в эфирном масле и эфиромасличном сырье

2.1. Основные положения

2.1.1 Принцип метода

Метод основан на извлечении нитрохлора и префорана из растительного образца ацетоном с последующим перераспределением из ацетоно-водной среды в н-гексан, очистке гексановых экстрактов растений и растворов эфирного масла концентрированной серной кислотой и определении методом ГЖХ с детектором постоянной скорости рекомбинации.

2.1.2 Метрологическая характеристика метода

Предел обнаружения: нитрохлора — 0,1 мг, префорана — 0,2 мг.

Предел обнаружения нитрохлора в шалфейном масле — 0,01 мг/кг, в эфиромасличном сырье — 0,002 мг/кг.

Предел обнаружения префорана в шалфейном масле — 0,02 мг/кг, в эфиромасличном сырье — 0,004 мг/кг.

Процент определения нитрохлора в шалфейном масле — 80,4%. Стандартное отклонение при n = 19 — 1,88%.

Процент определения префорана в шалфейном масле — 82,1%. Стандартное отклонение при n = 19 — 1,91%.

Процент определения нитрохлора в растении шалфея мускатного — 75,7%. Стандартное отклонение при n = 19 — 1,72%.

Процент определения префорана в растении шалфея мускатного — 78,3%. Стандартное отклонение при n = 19 — 1,53%.

2.1.3 Избирательность метода

Прочие рекомендованные на шалфее пестициды — хлорофос, диурон, которан, прометрин — определению не мешают.

2.2. Реактивы и растворы

• Ацетон — х.ч.
• Гексан — х.ч.
• Серная кислота конц. — х.ч.
• Сульфат натрия безводный — х.ч.
• Азот особой чистоты (газ-носитель)
• Стандартные растворы препаратов в ацетоне — 0,5 мкг/мл
• 5% силикона SE-30, нанесенного на хроматон N-AW, силанизированный DMCS (0,16 — 0,20 мм)
• 5% силикона XE-60, нанесенного на хроматон N-AW, силанизированный DMCS (0,16 — 0,20 мм).

2.3. Приборы, аппаратура и посуда

• Хроматограф «Цвет-106» с детектором постоянной скорости рекомбинации
• Микрошприц МШ-10 — 10 мкл
• Ротационный испаритель PVO-64 или эквивалент
• Гомогенизатор — тип 302 либо эквивалент
• Аппарат для встряхивания — АВУ или эквивалент.

Используется стандартная химическая посуда из стекла (колбы Бунзена, Эрленмейера, воронки Бюхнера, химические и делительные, пипетки и др.), выпускаемая отечественной промышленностью.

2.4. Подготовка к определению

Органические растворители перед началом работы необходимо очистить и перегнать, сульфат натрия прокалить при температуре 300 — 400 °C. Хроматографическая колонка и детектор кондиционируются в режимных условиях в течение 2 — 1 часов.

2.5. Ход анализа

2.5.1 Отбор образцов

Отбор проб на анализ производится в соответствии с «Правилами отбора проб на анализ пестицидов». Отбирают 50 г свежесобранной зеленой массы и 1 г эфирного масла шалфея мускатного.

2.5.2 Проведение определения

2.5.2.1. Эфирное масло шалфея мускатного. Навеску 10 г растворяют в 50 мл н-гексана. В делительной воронке емк. 250 мл гексановый раствор промывают концентрированной серной кислотой 3 х 30 мл. Верхний гексановый слой пропускают через безводный сульфат натрия в коническую колбу емкостью 100 мл. Серную кислоту собирают в колбу емкостью 250 мл и через 1,5 — 2 часа снова отделяют гексановый слой, который присоединяют к основному раствору. Объединенный гексановый раствор упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре бани 50 °C. К сухому остатку по стенкам колбы прибавляют 1 мл н-гексана, закрывают и встряхивают колбу. В испаритель хроматографа вводят 2 мкл раствора.

2.5.2.2. Эфиромасличное сырье шалфея мускатного. Навеску 50 г гомогенизируют с 200 мл ацетона в гомогенизаторе в течение 15 — 20 мин. со скоростью 8000 об./мин., встряхивают 30 — 40 мин. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр в колбу емкостью 500 мл. Стакан гомогенизатора промывают 3 х 20 мл ацетоном и через фильтр промывкой ацетон присоединяют к основному экстракту. Упаривают ацетоновый экстракт на водяной бане при температуре 50 °C до 10 мл. Остаток количественно переносят в делительную воронку емк. 500 мл, прибавляют 200 мл дистиллированной воды и реэкстрагируют нитрохлор и префоран 3 х 30 мл н-гексаном. Объединенный гексановый экстракт сушат, пропуская через безводный сульфат натрия, и на делительной воронке промывают концентрированной серной кислотой 3 х 30 мл. Дальнейший ход анализа аналогичен вышеописанному для эфирного масла шалфея.

2.6. Обработка результатов анализа

Количественный расчет препарата в анализируемой навеске проводят по следующей формуле:

                              Н х V
                                   1

Х = ------ х А, K х V 2

где:

Х — количество препарата в пробе, мг/кг;

Н — высота пика препарата в анализируемой пробе, мм;

V — объем анализируемой пробы, мл; 1

V — объем инъектируемой пробы, мкл; 2

А — навеска, г;

K — калибровочный коэффициент, который определяется по следующей формуле:

                          Н      Н      Н      Н
                      1    1      2      3      4

K = — (---- + ---- + ---- + ----),

                      4  С V    С V    С V    С V
                            1      2      3      4

где:

    Н ; Н ; Н ; Н  - высота пиков стандартного раствора препаратов, мм;
     1   2   3   4
    V ;  V ;  V ;  V  - объемы стандартного раствора препаратов, вводимые в
     1    2    3    4

хроматограф, мкл;

С — концентрация стандартного раствора 0,5 мг/кг.

Содержание микроколичеств нитрохлора и префорана в пробах вычисляют как среднее из трех параллельных определений.

2.7. Авторы

Методика разработана во ВНИИ эфиромасличных культур старшим научным сотрудником лаборатории гербицидов Барановым Ю.С., Брынзой Е.А. под руководством кандидата сельскохозяйственных наук Хилик Л.А.