Методические указания по определению тачигарена в воде методом тонкослойной хроматографии

(утв. Минздравом СССР 19.10.1979 № 2094-79)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТАЧИГАРЕНА В ВОДЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Е.И. Марциновского и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

Настоящие Методические указания распространяются на определение содержания тачигарена в воде при санитарном контроле.

1. Краткая характеристика препарата

       H C\   /N                                  Молекулярная масса 99,03.
        3  \ /                                    C H O N.
            О                                      4 5 2

Действующее начало препарата тачигарен (Ф-319) — 3-окси-5-метил-изоксазол. Чистое вещество — бесцветные игольчатые кристаллы с температурой плавления 86 — 87 °С, стабильное к действию кислот и щелочей. Растворимость в воде при 25 °С: 85 г в 100 мл. Хорошо растворим в метаноле, этаноле, ацетоне. Препарат рекомендуется для протравливания семян сахарной свеклы. Применяется в виде 70-процентного смачивающего порошка. ПДК тачигарена в воде в настоящее время не установлена.

2. Методика определения тачигарена в воде

2.1. Принцип метода. Метод основан на экстракции тачигарена из воды органическим растворителем с последующим определением с помощью тонкослойной хроматографии. Минимально открываемое количество тачигарена на тонкослойных хроматограммах 5 мкг.

2.2 Метрологическая характеристика метода приведена в таблице.

Диапазон определяемых концентраций 0,1 — 1,0 мг/л

Анализируемая проба	Предел обнаружения, мг/л	Число параллельных определений	Размах варьирования, %	Среднее значение определения, %	Стандартное отклонение, %	Относительное стандартное отклонение, %
Вода	0,1	5	20,0	84,6	7,17	8,47

2.3 Реактивы и растворы

Ацетон, хч, ГОСТ 2603-71.

Эфир для наркоза, Фармакопея СССР (перегнанный).

н-Гексан, ч, МРТУ 6-09-2937-66 (перегнанный).

Бензол, хч, ГОСТ 5955-68.

Натрий сернокислый безводный, ч, ГОСТ 4166-66.

Натрий хлористый, хч, ГОСТ 4233-66.

Крахмал картофельный растворимый для йодометрии, ГОСТ 10163-62.

Стандартный раствор тачигарена в н-гексане с содержанием 0,5 мг/мл. Помещают 50 мг тачигарена в мерную колбу на 100 мл и доводят до метки н-гексаном.

Азотнокислое серебро, чда, ГОСТ 1277-63.

Бромфеноловый синий, чда, ТУ МГ УХП 271-59.

Проявляющий реактив: в мерную колбу на 100 мл помещают 0,05 г бромфенолового синего, 10 мл ацетона и доводят до метки 0,5-процентным водно-ацетоновым раствором азотнокислого серебра (0,5 г азотнокислого серебра растворяют в смеси 24 мл ацетона и 76 мл дистиллированной воды).

Силикагель КСК, № 2, ГОСТ 3956-76, ТУ 6-09-2523-72. Для приготовления сорбционной массы для хроматографических пластинок 1 г крахмала заваривают в 15 мл дистиллированной воды, прибавляют еще 110 мл воды, 40 г силикагеля, измельченного и просеянного через сито 100/120 меш, и тщательно перемешивают. Это количество сорбционной массы равномерно наносят на 15 пластинок. Пластинки сушат на воздухе и хранят в эксикаторе.

2.4 Приборы и посуда

Делительные воронки на 1 л, ГОСТ 8613-75.

Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.

Мерные колбы на 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Грушевидные колбы на 100 мл, ГОСТ 10394-72.

Водяная баня, ТУ 46-22-603-75.

Вакуумный водоструйный стеклянный насос, ГОСТ 10696-75.

Стеклянный лабораторный холодильник, ХПТ, ГОСТ 9499-70.

Камера хроматографическая, 150 х 200, 105 х 165 мм, ГОСТ 10565-63.

Эксикатор, ГОСТ 6371-73.

Микропипетки, ГОСТ 20292-74.

Медицинский шприц на 1 мл.

Стеклянные пластинки, 9 x 12 см.

Сито капроновое, 100/120 меш.

Пульверизатор стеклянный для обработки пластинок.

Электроплитка, ТУ 92-275-76.

Сушильный шкаф, ТУ 64-1-1411-76Е.

Камера для обработки пластинок, ТУ 25-11-430-70.

2.5 Проведение определения

    Пробу  воды  (250  -  750 мл) помещают в делительную воронку, добавляют
хлористый  натрий  из расчета 3,3 г на 10 мл воды, энергично встряхивают до
полного  растворения  соли и экстрагируют тачигарен диэтиловым эфиром (100,

50 и 50 мл). В случае объема пробы воды 250 мл объем экстрагента может быть

уменьшен  (50, 25 и 25 мл). Объединенный экстракт сушат безводным сульфатом
натрия  (5 - 10 г) в течение 15 - 30 минут при периодическом встряхивании и
упаривают  растворитель на ротационном испарителе (температура водяной бани
не  выше  30  °С)  до  небольшого  объема  (~  1  мл).  Упаренный  экстракт
количественно  наносят  на  хроматографическую  пластинку  с  тонким  слоем
силикагеля  КСК, скрепленного крахмалом, с помощью медицинского шприца на 1
мл.  Слева  и  справа  от пробы наносят по два пятна (5 и 10 мкг) стандарта
тачигарена  в  виде  раствора  в н-гексане и проводят хроматографирование в
системе  растворителей  бензол  -  ацетон  (3:1).  Для  хроматографирования
используют  насыщенную  камеру.  Для  насыщения  стенки  камеры обкладывают
фильтровальной    бумагой,   которая   касается   смеси   растворителей   и
пропитывается.  Через  два  часа  быстро открывают крышку камеры и помещают
пластинку    для   развития   хроматограммы.   После   окончания   процесса
хроматографирования  (подъем  фронта  растворителя  на  11,5  см) пластинку
извлекают из камеры, сушат на  воздухе  в  вытяжном  шкафу  и  обрабатывают
проявляющим  реактивом.   При  наличии  в  пробе  тачигарена  на  пластинке
появляется светло-желтое пятно на  синем  фоне  с  величиной  R  = 0,88 +/-

                                                           f

0,02.  Оценку  качества  тачигарена   на   хроматограмме   проводят   путем
визуального сравнения размера и интенсивности  окраски  пятен  стандарта  с

пятном пробы.

2.6 Обработка результатов анализа

Для определения содержания тачигарена в воде используют следующую формулу:

                                 5
                               10  x А

Д = -------, а x R

где:

Д — содержание тачигарена в воде, мг/л;

А — количество тачигарена в пробе, найденное визуальным сравнением со стандартным пятном, мг;

---