Методические рекомендации по сбору, хранению и транспортировке материала от больных для бактериологической диагностики инфекционных заболеваний
Министерство здравоохранения РСФСР · № 06Б/7А-342Действующий акт
(направлены Письмом Минздрава РСФСР от 20.02.1979 № 06Б/7А-342)
от 20 февраля 1979 г. № 06Б/7А-342
МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
ПО СБОРУ, ХРАНЕНИЮ И ТРАНСПОРТИРОВКЕ
МАТЕРИАЛА ОТ БОЛЬНЫХ ДЛЯ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЙ
ДИАГНОСТИКИ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ <*>
<*> Рекомендации составлены сотрудниками Ленинградской, Московской областных санитарно-эпидемиологических станций, Республиканской санитарно-эпидемиологической станцией. Одобрены Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава РСФСР.
| Исследуемый материал | Сроки взятия | Количество материала | Емкость для сбора материала | Консервант | Способ забора материала | Время и способ доставки материала в лабораторию |
| БРЮШНОЙ ТИФ, ПАРАТИФ А и Б, ДРУГИЕ САЛЬМОНЕЛЛЕЗЫ | ||||||
| Кровь на гемокультуру | 1. Первые дни болезни 2. На поздних сроках (2 — 3 недели) | 15 — 20 мл 5 — 10 мл | Стерильная пробирка или флакон | Среда Раппопорт, желчный бульон и др. в соотношении 1:10 | Шприцем из локтевой вены | Собранный материал доставляется в лабораторию без промедления, лишь в исключительных случаях допускается хранение материала не более суток в холодильнике при температуре плюс 2 — 4 градуса |
| Для серологических | 1. На 1-й - | 5 — 8 мл. | Стерильная | - | Шприцем из локтевой вены. У | При транспортировке |
| исследований (парные | 3-й день | У детей - | пробирка | маленьких детей — из сосу- | следить, чтобы жидкость не | |
| сыворотки) | 2. На 7-й — 14-й день | 0,5 — 1,0 мл | дов пальца или мочки уха | смачивала ватные пробки, и предохранять собранный материал от замерзания. Доставка материала производится в жестяных контейнерах, пеналах, биксах и другой таре, исключающей повреждения пробирок | ||
| Испражнения | При подозрении на сальмонеллезную инфекцию — с первых часов заболевания, при тифопаратифах — с конца 2-й недели до начала лечения, не ранее двух дней после окончания лечения | Испражнения должны составлять 1/3 объема консерванта (1 — 2 г) | Стерильная пробирка или банка с консервантом | Глицериновая смесь, буферный раствор фосфорнокислых солей (pH — 8,0), селенитовая среда обогащения 5 — 6 мл | При естественной дефекации из судна, горшка, пеленки — стерильным деревянным шпателем, стерильной стеклянной или деревянной палочкой. При наличии в испражнениях гноя и слизи (но не крови) включить их в посевной материал непосредственно из прямой кишки ватным тампоном, который монтируется на стержень из дерева или алюминиевой проволоки сечением 3 — 4 мм, длиной 200 мм и высотой ватной части не менее 50 — 60 мм | Материал сопровождается специальным направлением, в котором указывается название учреждения, направляющего материал, фамилия, имя, отчество, возраст и адрес обследуемого, дата заболевания, диагноз или эпидемиологическое показание к проведению анализа. Дата и точное время забора материала и фамилия лица, производившего забор. В лаборатории обязательно регистрируется точное время доставки материала |
| Моча | У больных, начиная с конца первой недели заболевания, и у реконвалесцентов | 20 — 30 мл | Стерильные бутылки, банки, флаконы | Не используется | Естественным путем после тщательного туалета с соблюдением всех необходимых условий, исключающих внесение посторонней микрофлоры | Так же |
| Желчь (дуоденальное содержимое) | У больных в период реконвалесценции | Раздельно порции А, Б и С | Стерильные пробирки | - | Путем зондирования при помощи дуоденального зонда получают три порции желчи (А, Б и С) | Так же |
| Рвотные массы, | В первые | От 50 до | Стерильные бан- | - | - | Так же |
| промывные воды желудка | часы заболевания, в первые дни заболевания и даже на 7-й — 8-й день | 150 | ки, широкогорлые флаконы | |||
| Гной и экссудат воспалительных очагов | В течение всего заболевания | Неограниченное | Стерильная посуда (банки, чашки Петри) | - | Стерильным тампоном, шпателем | Так же |
| Патоморфологическое | 5 — 10 мл | - | Стерильным инструментом, | Так же | ||
| исследование — орга- | 2 — 5 г | исключая внешнее | ||||
| ны трупа (кровь из сердца, печень, селезенка, почки, костный мозг, мезентериальные узлы кишечника, отрезки тонкого и толстого кишечника с содержимым) | 10 мл | загрязнение. Кровь из сердца и желчь из желчного пузыря берут стерильной пастеровской пипеткой, предварительно обжигая место введения пипетки раскаленным скальпелем. Отрезки кишечника вырезают между двумя лигатурами. Кусочки паренхиматозных органов — стерильными ножницами, скальпелем | ||||
| ДИЗЕНТЕРИЯ | ||||||
| Испражнения | С первого дня заболевания до начала лечения, не ранее двух дней после окончания лечения | Испражнения должны составлять 1/3 объема консерванта (1 — 2 г) | Стерильные пробирки или банки с консервантом | Глицериновая смесь, буферный раствор фосфорнокислых солей (pH — 8,0), селенитовая среда обогащения 5 — 6 мл | При естественной дефекации из судна, горшка, пеленки — стерильным деревянным шпателем, стерильной стеклянной или деревянной палочкой. При наличии в испражнениях гноя и слизи (но не крови) включить их в посевной материал непосредственно из прямой кишки ватным тампоном | Так же |
| Серологическое | 1. На 1-й - | 5 — 8 мл. | Стерильная | - | Шприцем из локтевой вены. У | Так же |
| исследование крови | 3-й день | У детей - | пробирка | маленьких детей — из | ||
| (РА и РПГА в | 2. На 7-й - | 0,5 — 1,0 | сосудов пальца, пятки или | |||
| динамике) | 14-й день | мл | мочки уха | |||
| Патоморфологическое | 10 см | Стерильная | - | Стерильным инструментом, | Так же | |
| исследование — органы трупа (кишечник, мезентериальные железы, паренхиматозные органы) | 2 — 5 г | посуда (банки, чашки Петри) | исключая внешние загрязнения. Отрезки кишечника вырезают между двумя лигатурами. Кусочки паренхиматозных органов — стерильными ножницами, скальпелем | |||
| ПРОЧИЕ КИШЕЧНЫЕ ИНФЕКЦИИ (ЭНТЕРИТЫ, ГАСТРОЭНТЕРИТЫ, КОЛИТЫ), В ТОМ ЧИСЛЕ ВЫЗЫВАЕМЫЕ ЭПКП | ||||||
| При явлениях кишечной дисфункции - | С первого дня заболе- | 1 — 2 г От 50,0 до | Стерильные пробирки или банки | Глицериновая смесь, | При естественной дефекации из судна, горшка, пеленки - | Так же |
| испражнения, при появлении рвоты — рвотные массы, промывные воды желудка | вания до начала лечения. В течение всего периода заболевания | 150,0 | с консервантом Стерильная широкогорлая посуда | буферный раствор фосфорнокислых солей (pH — 8,0), селенитовая среда обогащения 5 — 6 мл | стерильным деревянным шпателем, стерильной стеклянной или деревянной палочкой. При наличии в испражнениях гноя и слизи (но не крови) включить их в посевной материал непосредственно из прямой кишки ватным тампоном | |
| При поражении мочевого пузыря — моча | У больных и реконвалесцентов | 20 — 30 мл | Стерильные банки, бутылки, флаконы | Не используется | Естественным путем после тщательного туалета с соблюдением всех необходимых условий, исключающих внесение посторонней микрофлоры | Так же |
| При поражении желчного пузыря — дуоденальное содержимое (желчь) | У больных в период реконвалесценции | Раздельно порции А, Б и С | Стерильные пробирки | - | Путем зондирования при помощи дуоденального зонда получают три порции желчи (А, Б и С) | Так же |
| При подозрении на колибациллярный сепсис — кровь | В течение всего заболевания | 5 — 10 мл | Стерильные пробирки, флаконы | Среда Раппопорт, желчный бульон и др. в соотношении 1:10 | Шприцем из локтевой вены | Так же |
| Патоморфологическое | 10 см | Стерильная | - | Стерильным инструментом, | ||
| исследование — орга- | 5 — 10 мл | посуда (банки, | исключая внешнее | |||
| ны трупа (содержимое тонкого кишечника, кровь из сердца, кусочки органов печени, селезенки, легкого, почек, лимфатические узлы кишечника) | 2 — 5 г | чашки Петри) | загрязнение. Кровь из сердца берут стерильной пастеровской пипеткой, предварительно обжигая место введения пипетки раскаленным скальпелем. Отрезки кишечника вырезают между двумя лигатурами. Кусочки паренхиматозных органов — стерильными ножницами, скальпелем | |||
| МЕНИНГОКОККОВАЯ ИНФЕКЦИЯ | ||||||
| Спинномозговая жидкость | При поступлении больного в стационар | 2 — 5 мл | 2 сухие стерильные пробирки | Не используется | Забор проводится с соблюдением всех правил асептики (забор проводить в маскереспираторе, не касаться руками краев канюли, иглы, краев пробирок, не переливать жидкость через край). Первую порцию ликвора (около 1 мл) помещают в сухую пробирку (для клинического исследования). Весь остальной ликвор помещают во вторую пробирку | Не допускается хранение. Доставка в лабораторию производится немедленно, в условиях, предупреждающих охлаждение. Если пунктирование проводится вечером или ночью, пробирки с материалом можно сохранять до начала работы лаборатории в термостате при температуре 37° |
| Кровь | С момента заболевания | 5 — 10 мл для гемокультуры | Флакон с 50 мл полужидкого агара 2 предметных стекла | - | Кровь забирают из вены с соблюдением всех правил асептики во флакон с полужидким агаром. Каплю крови наносят на предметное стекло и с помощью второго стекла делают мазок (аналогично мазку для подсчета форменных элементов крови). На другом предметном стекле делают два отпечатка (толстые капли) и, не растирая, подсушивают на воздухе. Рекомендации 1 Всесоюзной научно-практической конференции по менингококковым инфекциям. Каунас, 1973. Опубликованы в сборнике материалов конференции. Каунас, 1973 г. | Доставка в лабораторию немедленно, в условиях, предупреждающих охлаждение |
| Носоглоточная слизь | При обращении к врачу. С целью контроля лечения после исчезновения клинических явлений и не ранее чем через трое суток после окончания лечения антибиотиками. Материал забирают двукратно с интервалом в 1 — 2 дня | - | Ватный тампон, вмонтированный в пробирку, при взятии материала изгибается под углом в 110 — 120° | Не используется | Забор носоглоточной слизи проводят натощак или не ранее 3 — 4 часов после приема пищи или питья. Шпателем, находящимся в левой руке, фиксируют корень языка, одновременно тампон (в правой руке) по шпателю заводят под мягкое небо в носоглотку, поворачивают концом вверх и делают два штриха сверху вниз. Надавливание шпателем на корень языка и забор материала тампоном должны быть одновременными. Тампон извлекают по шпателю, не касаясь зубов, слизистой щек, языка | Транспортировка незасеянных тампонов не допускается. Собранный материал засевают у постели больного на теплые чашки со свежеприготовленной питательной средой путем тщательного втирания материала в поверхность среды. Тампон поворачивают всеми сторонами. Материал от одного лица засевают на сектор (1/4 — 1/6) чашки с ристомициновой средой, затем на 1/2 — 1 чашку с сывороточным агаром. При отсутствии ристомицина материал от одного лица можно засеять на две чашки с сывороточным агаром. Засеянные чашки транспортируются в лабораторию немедленно, в условиях, предупреждающих охлаждение |
| Трупный материал | Производить | - | Стерильные бан- | - | Кусочки тканей и органов с | Материал доставляют в |
| (кровь, кусочки органов, гной с мозговых оболочек) | исследование трупного материала имеет смысл только в первые часы после смерти, пока не произошло остывание трупа | ки с притертыми пробками, сухие стерильные пробирки, пробирки с вмонтированными в них ватными тампонами | помощью стерильного пинцета помещают в банки. Кровь, гной отбирают с помощью стерильных стеклянных трубок и помещают в пробирки; для этих же целей можно использовать ватные тампоны, вмонтированные в пробирки | лабораторию в условиях, исключающих охлаждение | ||
| КОКЛЮШ И ПАРАКОКЛЮШ | ||||||
| Носоглоточная слизь | При первичном обращении к врачу по поводу кашля — до начала лечения (в течение 10 — 14 дней от начала заболевания). Материал забирают дважды — два дня подряд или через день | - | Ватный тампон, вмонтированный в пробирку, при взятии материала изгибается под углом в 110 — 120° | Можно применять тампон, увлажненный фосфатным буфером с углем <*>. Такой тампон может быть использован в течение 2 — 3 дней со дня получения в лаборатории (при условии хранения при температуре плюс 4 — 6 °С). Метод апробирован в лаборатории Московской областной СЭС | Забор материала производится натощак или не ранее 3 — 4 часов после приема пищи или питья. Техника забора материала сухим и влажным тампонами одинакова. Шпателем, находящимся в правой руке, фиксируют корень языка, одновременно тампон (в правой руке) по шпателю заводят за корень языка, поворачивают концом вниз и делают два штриха по задней стенке глотки. Тампон извлекают из полости рта, не касаясь слизистой языка, щек, миндалин. Метод забора материала кашлевыми пластинками используют только в случае спазматического кашля и применяют параллельно с методом активного забора тампоном. У детей первого года жизни всегда следует пользоваться заднеглоточным тампоном | Материал, забранный сухим заднеглоточным тампоном, должен быть немедленно засеян на чашки с питательной средой. Транспортировка тампона не допускается. Материал с одного тампона засевают последовательно в две чашки Петри со специальной питательной средой, тщательно втирая его сначала по периферии чашки, затем в центре (максимально используя всю поверхность питательной среды). Стеклянным шпателем тщательно растирают материал в центре чашки. В случае применения увлажненного тампона последний должен быть доставлен в лабораторию не позднее 3 — 4 часов с момента взятия материала. Чашки с посевами доставляются в лабораторию в условиях, исключающих охлаждение |
| ДИФТЕРИЯ | ||||||
| Слизь и пленки из зева (с обеих миндалин) и носа. | Немедленно при первом подозрении | - | Стерильные пробирки с вмонтированными | На случай транспортировки на | Слизь из зева и носа забирают отдельными тампонами, вмонтированными в разные | Тампоны с материалом должны быть доставлены в лабораторию не позднее 2 - |
| При дифтерии редких локализаций (глаз, ухо, рана, кожа, влагалище) забирают материал с пораженных участков | на заболевание дифтерийной этиологии | в них сухими ватными тампонами | дальние расстояния применяют такие же тампоны, но увлажненные | пробирки и промаркированными «зев — нос». Материал берут натощак или не ранее чем через 2 часа после еды. После проведенного курса лечения антибиотиками мазки | 3 часов с момента забора в условиях, предохраняющих от переохлаждения. Увлажненные тампоны рекомендуется использовать при транспортировке на | |
| и одновременно из зева и носа | 5-процентным раствором глицерина или пробирки со средой обогащения. Тампон в последнем случае монтируется выше среды обогащения, после забора материала погружается в нее | следует брать не ранее чем через 3 дня после окончания лечения. Забор материала из зева проводится одним тампоном с обеих миндалин путем легкого надавливания на них при обязательной фиксации языка шпателем. Тампон не должен касаться языка, слизистой щек и зубов. При наличии налетов материал забирают на границе пораженных и здоровых тканей, срывать пленки не рекомендуется. Другим тампоном забирают материал из носа, вводя тампон в носовые ходы на глубину 1 — 1,5 см | дальние расстояния | |||
<*> Рецепт опубликован в журнале «Лабораторное дело», № 11, 1973.